高产乳酸菌种的选育及其发酵棉粕营养特性的研究 .doc

分类号： 密 级：公开 学 号：2010108013 单位代码：10759 石河子大学 硕 士 学 位 论 文 高产乳酸菌种的选育及其发酵 棉粕营养特性的研究 学位申请人 吴 妍 妍 指 导 教 师 张 文 举 教授 申请学位门类级别 农学硕士 学科、专业名称 动物营养与饲料科学 向方究研 饲料资源的开发与利用 院学在所 动物科技学院 中国新疆石河子 2013 年 5 月  A Study on Screening and Breeding of High-yield Lactic Acid  Bacteria and the nutritional characteristics of Fermented Cottonseed Meal A Dissertation Submitted to Shihezi University In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Agriculture By Yan-Yan Wu (Animal Nutrition and Feed Science) Dissertation Supervisor: Prof. Wen-Ju Zhang May，2013 Shihezi, Xinjiang, China  I  要  II  目的：本研究以嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）为出发菌种，筛选出高产酸性能的嗜酸乳酸 菌，以棉粕和玉米为固体发酵底物，采用所选育菌种进行发酵，研究发酵条件参数、底料组成、接 种量的优化以及发酵产物代谢组分和营养价值 。并就发酵棉粕对肉仔鸡生长性能、血液理化指标和 免疫指标的影响进行了研究。为嗜酸乳杆菌发酵棉粕的综合评定和合理利用提供理论支撑。 方法：本研究由四个部分组成。试验一: 从S1、W2、J2三株嗜酸乳杆菌中选取一株产乳酸较高 、生长 较好的菌株，并对该菌株进行自然选育出一株高产乳酸的菌株 ，并鉴定其为嗜酸乳杆菌。试验二:旨 在优化嗜酸乳杆菌发酵棉粕的发酵工艺，采用 4 因子5 水平的正交设计法和二因子有重复观察值相结 合的设计方法，通过发酵底物中乳酸含量，确定发酵参数、发酵底料组成和接种比例。 试验三：分 别采用嗜酸乳杆菌 S5、W2、J2按照试验二的优化条件发酵棉粕，分 别为对照组、S5组、W2组、J2 组共4 组，研究发酵产物中有机酸、B族维生素、游离氨基酸含量的变化。 试验四：选取1 日龄AA肉 仔鸡100羽，随机分成2 组，每组5 个重复，每个重复 10羽，对照组添加6%的未发酵棉粕，试验组添 加6%的发酵棉粕，研究嗜酸乳杆菌发酵棉粕对 AA肉仔鸡生长性能、血液理化指标及免疫指标的影 响。 结果：试验一：菌株S5在培养36 h 后其产酸量可达2.14 g/L，通过生理生化鉴定和 16SDNA全序列分 析法确定其种属，然后经过 Gene Bank基因比对确定同源基因，用 DNAMAN软件绘制系统发育树， 鉴定为嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）。试验二：嗜酸乳杆菌发酵棉粕的优化结果为 ：温度 为37℃、时间为48 h、底物初水分为30%、初始pH为6 、底料组成为棉粕：玉米为9：1；接种量为50 mL/kg。试验三：S5组较对照组，戊酸含量极显著提高了49.32%，琥珀酸、柠檬酸显著降低了77.57%、 1.93%，VB1 、VB2 、VB5的含量极显著提高了28.53%、50.91%、89.47%（P0.01），亮氨酸、赖氨酸 含量分别极显著提高了19.84%、33.63%（P 0.01）；W2组较对照组，戊酸、柠檬酸显著提高了79.82%、 10.77%（P 0.01），VB1、VB3 、VB5极显著降低了19.43%、91.35%、23.52%（P0.01），亮氨酸、苯 丙氨酸含量分别极显著降低了 16.64%、4.43%（P 0.01）；J2组较对照组，戊酸、琥珀酸的相对含量 极显著提高了127.19%、14.95%（P 0.01），VB1、VB2、VB3、VB5