洗衣液对微核的影响.doc

洗衣液对大蒜根尖细胞微核形成的影响 摘要：为研究洗衣液的遗传毒性，本实验利用大蒜根尖的微核技术，以不同浓度的洗衣液为诱变剂，测定大蒜根尖细胞的微核率。实验结果：洗衣液浓度越高，大豆根尖微核率越大。从而证明洗衣液对大蒜根尖具有明显的诱变作用，且随剂量的增加诱变效果增强。 关键词：洗衣液；大蒜根尖；微核 Effect of washing-liquid on the micronucleus formation to root tip cells of garlic Abstract: In order to investigate the genetic toxicity of laundry detergent, this experiment using micro nuclear technology of garlic root tip, with different concentrations of laundry detergent as mutagen, to measure the micronucleus rate of garlic root tip cells. The result is that the higher the concentration of laundry detergent, the greater the soybean micronucleus rate of root. It proves that laundry detergent has obvious mutagenic effect in garlic root tip, which increases with the increase of the dose mutagenic effect. Keywords: washing-liquid；tip cells of garlic；micronucleus 引言 洗衣液在日常生活中被广泛使用并被排放到环境而产生影响。有学者以蚕豆根尖细胞微核率为指标，对洗涤剂的遗传安全性进行评价，从而证明洗涤剂对蚕豆根尖细胞具有明显的诱变作用［1～2］。细胞分裂过程中微核的形成是细胞受遗传毒物作用后的一种遗传学终点［3～4］。大蒜根尖微核监测技术已广泛应用于环境监测的各个领域。本实验采用蚕豆根尖微核技术来研究洗衣液的遗传毒性，为进一步研究洗衣液对动植物、人类及环境的遗传毒性和潜在危害提供证据。 1 材料与方法 材料 由华南师范大学生命科学学院实验室提供的蚕豆 方法 1.2.1大蒜萌发 将实验用的适量的大蒜放在铺有湿纱布的瓷盘中，在黑暗条件下25℃催芽36-48h,等大部分的根长到1-2cm时，即可用于检测。 1.2.2洗衣液处理根尖 配置两种不同浓度的洗衣液溶液（洗衣液：蒸馏水= 1∶9、1：29) ，以蒸馏为水对照，每一处理选取约5棵生长良好、根长一致的大蒜，放入盛有待测物溶液的培养皿中，使被测液浸没根尖，处理12-18h。 1.2.3根尖恢复培养 处理后的种子用自来水浸洗3次，每次2-3min,然后再放入铺有湿纱布的瓷盘中25℃培养24h。 1.2.4根尖细胞固定 将恢复后的种子，从根尖顶端切下1cm长的幼根，用卡诺固定液固定24小时。固定后的根如不及时制片，可换入70%的乙醇溶液中置4℃冰箱中保存备用。 1.2.5酸解 用蒸馏水浸洗固定好的幼根两次，每次5分钟，吸净蒸馏水，加入6mol/L盐酸将幼根浸没，室温下酸解10分钟，幼根软化即可。 1.2.6染色 吸去盐酸，用蒸馏水浸没幼根三次，每次1～2分钟。最后浸于水中。制片前放置载玻片上，截下1～2mm左右长的根尖，滴一滴醋酸洋红染液，染色5～8分钟，加盖玻片，压片观察。 计算 1.3.1计算微核千分率 在低倍镜下找到分生区细胞分散均匀、分裂象较多的部位，再转到高倍镜下观察；每一处理观察3条根尖，求平均值，即为该处理的微核千分率。 微核千分率( FMN‰) = 微核数/观察细胞数×1000。 1.3.2 统计学分析 用对照组和各浓度洗衣液处理的数据进行卡平方测验，从差异显著性判断洗衣液的诱变性 1.3.3计算诱变效应指数 诱变效应指数=样品实测微核千分率/对照实测微核千分率 依据此式也可计算洗衣液的诱变效应指数。诱变效应指数在0-1.5区间时，基本没有效果；1.5-2.5区间，效果不明显；2.5-3.5区间，效果一般般；3.5以上为效果明显。 结果与分析 洗衣液对大蒜根尖微核千分率的影响 分析结果见表1,由表1可得，不同浓度洗衣液处理的大蒜根尖细胞微核千分率，为稀释1:9 稀释1:29蒸馏水，说明不同浓度的洗衣液均能诱发大蒜根尖细胞产生微核，并随着洗衣液浓度的增加，微核千分率增大