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TDZ对草莓外植体再生的影响
不同激素配比对草莓叶片不定芽发生的影响
作者:蒋威
(吉林师范大学 生命科学学院 四平 136000)
指导教师:周晓馥
摘 要:本文以草莓叶片为外植体,研究了不同激素组合、AgNO3浓度对草莓再生的影响,建立了稳定的草莓叶片再生体系。结果表明:当培养基为MS+TDZ(1.0mg/L)+IBA(0.4mg/L)+AgNO3(2.5mg/L)时,不定芽再生率最高。
关键词:草莓;TDZ
Different hormone ratio of strawberry leaves in vitro shoot the influence of happened
Jiang Wei
(College of Life Sciences, Jilin Normal University, Siping 136000,china)
Instructs the teacher: Zhou Xiaofu
Abstract: This paper with strawberry leaves for explant, study the different hormone combination, AgNO3 concentration on the influence of strawberry regeneration, established a stable strawberry leaves regeneration system. The result shows that: when the culture medium for MS + TDZ (1.0 mg/L) + IBA (0.4 mg/L) + AgNO3 (2.5 mg/L), the highest rate in vitro shoot regeneration.
Keywords: Strawberry; TDZ
草莓是多年生草本植物,属蔷薇科草莓属,又叫洋梅,全世界共有50多种。其原产地是欧洲,草莓呈心形,色泽鲜艳,果肉多汁,酸甜可口,营养丰富,被人们誉为“水果皇后”。草莓植株矮小,有根状茎,能向上分化长出新茎。它主要有喜光、喜水、喜肥、怕涝等特点,草莓的生育周期短并且产量非常高,现在国内外对草莓叶片再生体系的研究已有一些报道【1-3】。以往草莓品种改良常采用常规的杂交育种技术,但这种育种方式周期长,选择效率也很低,现代生物技术开辟了新途径进行草莓育种。再加上草莓有无性繁殖的特点,因此更适合用基因工程技术进行育种。目前,利用生物技术将目的基因导入草莓,实现以草莓作为植物反应器来生产药用蛋白质,最终获得具保健功能性鲜食水果,前景极为诱人。但要想利用现代生物技术对草莓进行定向遗传改良,首先是要建立高效、稳定的离体再生体系【4】。草莓叶片再生体系研究涉及的主要品种有 “吐德拉”、 “甜查理”、 “全明星”“丰香”等【5-7】。研究内容主要有叶龄、暗培养时间、叶片放置方式、基本培养基、硝酸银浓度、激素配比、不同光质等方面,不同品种的再生培养体系均有各自的最适范围【8-10】。草莓又有依靠匍匐茎进行繁殖的特点,使得草莓很易受到病毒病感染,严重影响了草莓产量和质量。目前,对于草莓病毒病尚无有效的药剂可以防治,唯一有效的技术途径就是采用组织培养脱毒的方法来生产、栽培无病毒幼苗。但利用茎尖等常规培养方法脱毒繁殖无毒草莓,效果并不是很好,脱毒率也较低。1971年Fowler等首先由草莓花药培养经脱分化形成愈伤组织再分化出不定芽形成植株【11】。大泽胜次等也证明了草莓花药培养植株可脱出病毒并且效果较好,因此该方法常应用于培养无病毒苗木【12】。
TDZ是一种棉花脱叶剂,其化学名称为N 苯基Nl 1,2,3 噻二唑 5 脲,是德国Schering公司1976年合成的高效激素棉花脱叶剂【13】。它是一种难溶于水,易溶于酒精的浅黄色晶体化合物,可以用0.1MNaOH溶液助溶,能不同程度的溶于其他有机溶剂,如:苯、丙酮、DMSO等。TDZ是一种高效的植物生长调节剂,在植物组织培养快速繁殖体系中应用广泛,范围涉及到草本植物和木本植物,在已研究的植物中,它的用量约为0.00226~0.226mg/l。20世纪90年代到现在,关于TDZ诱导的植物形态发生过程的研究以及其介导的生理生化反应取得突破性进展。TDZ在植物组织培养中可以独立的或者与其他植物生长调节剂共同使用,从而实现对植物细胞诱导和调节的作用。在20世纪80年代早期,TDZ作为一种细胞分裂素类物质被用于不定芽的再生。许多对TDZ产生应答的植物种类以前是被认为难以诱导植株再生,TDZ被认为是许多植物种类诱导植株再生的唯一生长调节物质。目前,人们对离体培养材料再生的生理过程还不完全了解,采取了多种技术进行研究。研究表明,TDZ所引起的生
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