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专题5 DNA和蛋白质技术
课题3 血红蛋白的提取和分离
1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )的生理盐水 ②甲苯 ③磷酸缓冲液 ④蒸馏水 ⑤柠檬酸钠 B.①④解析:0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂答案:A在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽与其有关的是( )凝胶色谱柱的制作 B.色谱柱的装填洗脱过程 D.样品的处理解析:在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽说明色谱柱答案:B下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是( )用蒸馏水进行红细胞的洗涤其目的是去除细胞表面的杂蛋白将血红蛋白溶液进行透析其目的是去除相对分子质量较大的杂质血红蛋白释放时加入有机溶剂其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂整个过程不断用磷酸缓冲液处理是为了维持血红蛋白的结构解析:对红细胞洗涤时应该用生理盐水不能用蒸馏水错误;将血红蛋白溶液进行透析其目的是去除相对分子质量较小的杂质B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂其目的是溶解磷脂加速血红蛋白的释放错误;整个过程不断用磷酸缓冲液处理是为了维持pH相对稳定防止和血红蛋白的结构发生改变正确。答案:D凝胶色谱柱取长为40 cm内径为1.6 cm有关说法中不正确的是( )一般凝胶色谱柱直B.凝胶色谱柱过高超过1 m不影响分离的效果凝胶色谱柱过矮则影响混合物的分离度凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液样品的稀释度过大解析:一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果但是直径过大会造成洗脱液体积增大样品的稀释度过大因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。凝胶色谱柱的高度与分离度有关一般不超过1 m。答案:B下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装
(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有________功能。(2)甲装置中是血红蛋白溶液则A是________;乙装置中溶液的作用是________。(3)甲装置用于________目的是__________________。用乙装置分离蛋白质的方法叫________是根据__________分离蛋白质的有效方法。(4)用乙装置分离血红蛋白时待__________________时用试管收集流出液每5 mL收集一管连续收集。解析:(1)血红蛋白能携带氧气体现了蛋白质具有运输功能。(2)甲装置中是血红蛋白溶液则A是磷酸缓冲液;乙装置中溶液的作用是洗脱血红蛋白。(3)甲装置用于透析(粗分离)目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白4)待红色的蛋白质接近色谱柱底端时用试管收集流出液每5 mL收集一管连续收集。答案:(1)运输 (2)磷酸缓冲液 洗脱血红蛋白 (3)透析(粗分离) 去除样品中分子量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小 (4)红色的蛋白质接近色谱柱底端1.使用( )
解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道路程较长移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质路程较短移动速度较快首先洗脱出来。答案:B使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决( )电荷的多少 B.分子的大小肽链的多少 D.分子形状的差异解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别使电泳迁移率完全取决于分子的大小。答案:B在血红蛋白的整个提取过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是( )防止血红蛋白被氧气氧化血红蛋白是一C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程让血红蛋白处在稳定的pH范围内维持其结构和性质解析:磷酸缓冲液的作用是稳定pH从而维持血红蛋白的结构和性质。答案:D下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤其中正确的是( )蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、鸡C.对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳解析:蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步错误;蛋白质的提取和分离实验一般用哺乳动物的成熟的红细胞作为实验材料分离血红蛋白一般不要鸡、蛙等动物血液为材料分离血红蛋白错误;样品处理的一般步骤分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋C错误;对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳正确。答案:D从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大其原因不是( )蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感更易
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