一、基因诊断的概念和特点.ppt

第一节 基因诊断 一、基因诊断的概念和特点 二、基因诊断的常用技术方法 三、基因诊断的应用 （一）基因诊断的概念: 利用现代分子生物学技术和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。 一、基因诊断的概念和特点 （二）基因诊断的特点 针对性强 特异性高 灵敏度高 适用性强 二、基因诊断的常用技术方法 （一）、核酸分子杂交技术 （二）、聚合酶链反应(PCR) （三）、基因测序 （一）核酸分子杂交技术 限制性内切酶酶谱分析法 DNA限制性片段长度多态性分析 等位基因特异寡核苷酸探针杂交法 限制性内切酶酶谱分析法举例 镰形细胞贫血原因：β-珠蛋白链第6位的GAG→GTG，造成Glu→Val所致。 限制性内切酶酶谱分析法举例镰形细胞贫血 限制性内切酶酶谱分析法举例镰形细胞贫血 3、等位基因特异寡核苷酸探针杂交法 设计针对突变和正常的寡核苷酸探针分别进行杂交 在严格条件下进行杂交和洗膜 （二）聚合酶链反应(PCR) 扩增片段长度的变异：有插入或缺失时，扩增长度会增加或变小，与正常长度比较，找出致病基因 PCR-RFLP分析：相差1个碱基，改变酶切位点，因此经酶切后会产生正常基因扩增的扩增产物长度不同的片段 PCR-ASO(SSO)分析：按严格条件进行杂交，找出致病基因。有多种探针可进行反向斑点杂交技术 PCR-序列分析法：对于未知突变或少见的