人教版高中生物选修一(课件)-专题55.1DNA和蛋白质技术.ppt

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人教版高中生物选修一(课件)-专题55.1DNA和蛋白质技术

一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 在破碎鸡血细胞时,要先加入20 mL的蒸馏水,其作用是(  ) A.使DNA溶解于水中 B.使血细胞破裂,释放DNA C.稀释血液,防止凝固 D.有利于搅拌 解析:实验中首先要将细胞中的DNA释放出来,一般用低渗溶液如蒸馏水使细胞过度吸水而破裂,而不是采取机械破碎。 答案:B 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 1.DNA粗提取实验的关键步骤 (1)制备鸡血细胞液时,要在新鲜鸡血中加入抗凝剂如柠檬酸钠,使血液分层,取下层血细胞沉淀。 (2)获取较多DNA的关键是向鸡血细胞液中加入足量的蒸馏水,以便使细胞破裂。 (3)实验中有两次使用蒸馏水。第一次加蒸馏水是在获取DNA滤液时,是为了使血细胞吸水膨胀破裂,加水后必须充分搅拌,应不少于5 min,使血细胞充分破裂;第二次加蒸馏水是在去除滤液中杂质时,加水是为了稀释氯化钠溶液,使DNA逐渐析出。 (4)在DNA的析出与鉴定中,必须使用冷酒精(至少在5 ℃以下存放24 h),并且将一份含DNA的氯化钠溶液加入到两份冷酒精中,如果悬浮在溶液中的DNA丝状物较少,可将混合液放入冰箱中再冷冻几分钟。 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 2.实验现象不明显的原因分析 (1)材料中核物质没有充分释放出来,如研磨不充分或蒸馏水的量不够。 (2)加入酒精后摇动或搅拌时过猛,DNA被破坏。 (3)二苯胺试剂配制时间过长,变成浅蓝色,影响鉴定效果。 (4)析出含DNA的黏稠物时,蒸馏水一次快速加入,影响实验结果。 (5)实验中有多次搅拌,但是其目的及操作方法是不同的,操作时应注意区分,否则会影响实验结果。 知识架构 一 二 1.混淆实验中 “三次过滤”和“三次加氯化钠溶液”的操作目的。 (1)DNA粗提取中共有三次过滤。过滤时使用的纱布层数与过滤的目的(是得到其滤液还是黏稠物)有关。破碎细胞,获取DNA的滤液和析出DNA并鉴定时,要用其滤液,使用1~2层纱布。去除滤液中杂质时,要用其滤出黏稠物,使用多层纱布。 (2)实验中有三次加氯化钠溶液。第一次是在破碎细胞获取DNA滤液时,加入氯化钠溶液是为了提高DNA的溶解度。第二次和第三次都是在去除滤液中的杂质的步骤中。第二次加入氯化钠溶液,是为了调节氯化钠溶液物质的量浓度为2 mol/L,过滤除去不溶的杂质。第三次加入氯化钠溶液是为了将析出的DNA丝状物溶解。 【例1】 在“DNA粗提取与鉴定”实验中,将获得的含有DNA的黏稠物(含较多物质)分别处理如下: (1)放入物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中,搅拌后过滤,得到黏稠物A和滤液a; (2)放入物质的量浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液中,搅拌后过滤,得到黏稠物B和滤液b; (3)放入冷却的体积分数为95%的酒精溶液中,搅拌后过滤,得到黏稠物C和滤液c。 以上过程获得的滤液和黏稠物中,因为只含有少量DNA而可以丢弃的是(  ) A.AbC   B.ABc C.Abc D.abc 解析:(1)由于DNA可以溶于氯化钠溶液中,在物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中DNA的溶解度较高,搅拌过滤后,DNA存在于得到的滤液a,而黏稠物A只含有少量DNA而可以丢弃;(2)DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低,此时DNA会从溶液中析出,搅拌过滤后,得到黏稠物B主要就是DNA,因此滤液b可以丢弃;(3)由于DNA不溶于酒精,而其他杂质可以溶于酒精,因此放入冷却的体积分数为95%的酒精溶液中,搅拌过滤后,DNA存在于黏稠物C中,滤液c可以丢弃。 答案:C 2.误以为鉴定DNA时既可以用二苯胺也可以用甲基绿。甲基绿本身是蓝绿色的碱性染料,它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。因为甲基绿本身有颜色,就算没有DNA,它也会是蓝绿色,所以用甲基绿不是很准确。而二苯胺和DNA反应呈现蓝色。鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。因此用二苯胺鉴定DNA更准确。 【例2】 下列有关实验的叙述,正确的是(  ) A.在DNA粗提取和鉴定实验中,可以用甲基绿代替二苯胺检测 B.用斐林试剂检测还原性糖时,可以用西瓜汁代替苹果或梨匀浆 C.在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时,可用表皮细胞代替根尖细胞 D.平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法 解析:甲基绿是染色剂,易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。因为其本身有颜色,就算没有DNA,它也会是蓝绿色,所以在DNA粗提取和鉴定实验中,不能用甲基绿代替二苯胺检测,A项错误;用斐林试剂检测还原性糖时,因为西瓜汁虽富含还原性糖但是红色的,所以不可以用西瓜汁代替苹果或梨匀浆,B项错误;在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时,由于表皮细

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