第四章药物定量分析与分析方法验证.ppt

第四章 药物定量分析与分析方法验证 （一） 不经有机破坏的分析方法： ①直接测定法 凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些C-M（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中可以电离，可选用本法。 例1：富马酸亚铁的含量测定（铈量法，ChP 2000） （二）经水解后测定法1.碱水解后测定法 是将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素经水解作用转变为无机的卤素离子，然后选用间接银量法进行测定。本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物，如卤素和脂肪碳链相连者。 3、经还原分解后测定法 ①碱性还原后测定 卤素结合于芳环上时，由于分子中碘的结合较牢固，需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）回流，使碳-碘键断裂，形成无机碘化物后测定。 ②酸性还原后测定法 两法均是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应，使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（Fajans法）测定。 （一）湿法破坏 1、硝酸-高氯酸法： 适于生物样品的破坏，如血、尿、组织等。。反应剧烈、切勿蒸干、以防爆炸但对含氮杂环破坏不完全，应用干法灼烧。无机金属离子一般为高价态。 2、硝酸-硫酸法： 适于大多数有机药物，如染料、中间体、药物等。但不用于碱土金属有机药物（用硝酸-高氯酸法） 3、H2SO4—硫酸盐法 用于含砷或锑有机药物破坏。所用硫酸盐为硫酸钾或硫酸钠，目的是为了提高硫酸沸点，使其破坏完全。无机金属离子为低价态。 4、其他湿法 尚有硝酸-硫酸-高氯酸法、硫酸-过氧化氢法、硫酸-高锰酸钾法。 湿法破坏一般用硅玻璃或硼玻璃制的凯氏烧瓶。进行空白试验校正。含金属元素10-100μ g范围内，取样10g；生物样品：血样10-15ml，尿样50ml。 注意事项：1.湿法破坏所用的仪器，一般为硅玻璃或硼玻璃制成的凯氏烧瓶；2.所用试剂及蒸馏水均不应含有被测金属离子或干扰测定的其他金属离子等组分；3.由于整个操作过程所用矿酸量数倍于样品，所以必须按相同条件进行空白试验校正；4.操作时应在通风橱内进行。 样品的取用量，应视被测含金属有机药物中所含金属元素的量和破坏后所用测定方法而定。一般来说，含金属元素量在10μg一100μg范围内时，取样量为10g;如果测定方法灵敏度较高，取样量可相应减少。对于生物样品，一般血样10ml一15ml或尿样50ml。 凯氏定氮法： 原理：在催化作用下，用浓硫酸将有机物分解破坏，使有机分子中的N转变为（NH4）2SO4，加碱碱化后使（NH4）2SO4分解，将滴出的NH3蒸馏在H3BO3溶液中，用H2SO4标准液滴定至终点。根据消耗的量计算出有机物中N的量。 四步骤：消解、蒸馏、吸收、滴定。 试剂：浓硫酸：氧化剂、碳化剂； 硫酸钾：提高H2SO4的沸点； 硫酸铜：催化剂，使之更完全、更彻底。 注意事项：从消解开始做空白试验。 应用本法时要注意以下几个问题：①加热或灼烧时，应控制温度在420℃以下，以防止某些被测金属花合物的挥发。②经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但此时切勿弃去。③灰化完全与否，直接彭响侧定结果的准确性。 （三）氧瓶燃烧法 ①定义：氧瓶燃烧法（oxygen flask combustion method)系将有机药物放入充满氧气的密闭烧瓶中进行燃烧，将产生的欲测物吸收于吸收液中，再用适宜方法测定。适于卤素有机药物或含硫、氮、硒等其他元素的有机药物。其吸收液多是水或水与氢氧化钠的混合液。 第二节 定量分析方法特点 容量分析法用原料药精制品(含量99.5％)或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于0.2％；进行回收率试验。回收率一般在99.7～100.3％之间。 二、光谱分析法 光谱 光谱分析法 分光光度法 分类 紫外-可见分光光度法 红外分光光度法 原子吸收分光光度法 荧光分光光度法 火焰光度法 五、定 量 限 1、定义：定量限（limit of quantitation ，LOQ）是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。 2、确定方法：常用信噪比法确定定量限。杂质和降解产物进行定量测定时，要求LOQ常用信噪比法确定定量限，一般以S/N=10时相应的浓度进行测定。 六、线 性 1、定义：线性系指在设计的范围内，测试结