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基因重组与转座遗传 第十二章 本章要求 第一节 DNA的重组 第 一 节DNA的重组 DNA Recombination 重组机制 一.交叉理论（chiasmatatype hypothesis） 1909年Janssens并提出了交叉型理论 二.断裂和重接模型 1937年Darlington提出 三.模板选择学说（copy choice ） Belling J.首先提出的，1933年他又撤回了 这一假设。 四 .1948年Hershey提出模板选择学说 断裂重接模型和模板选择复制模型的否定 断裂重接模型不能解释基因转变和极化子现象 模板选择复制模型存在的问题： (1) 违背了半保留复制； (2) DNA复制应在S期，重组应在偶线期， 不应同时发生。 (3)不能解释3线和4线交换。 基因转变----与遗传重组有关 1930年Winkler把真菌中不规则分离现象解释为基因转变（conversion） Lindegren,C.C（1949）报道了酵母有规律的异离常分离现象：交配型A×a的杂交中，有些子囊所含的孢子为（3A+1a），也称为基因转变。 50年代中期Mitchell,M. B. 异常分离不是由于整个染色体的异常行为，而是由于特定位点的“基因转变”所致，即属于基因内重组。 Olive, E1-Ani和Kitani等在粪壳菌(Sodaria fimicola)中也发现了异常分离。认为这种异常分离是有丝分裂的产物，称为减数后分离(postmeiotic segreation) Holliday 模型 以E.coli的同源重组为例，了解同源重组机制的Holliday模型。 Holliday模型中，同源重组主要4个关键步骤 ①两个同源染色体DNA排列整齐 ②一个DNA的一条链断裂、并与另一个DNA对应的链连接，形成Holliday中间体 ③通过分支移动产生异源双链DNA ④Holliday中间体切开并修复，形成两个双链重组体DNA，分别为： Holiday模型说明了遗传重组过程,也说明了基因转变的现象 一．λ在aat位点的整合 二．倒位重组 沙门氏细菌（Salmonella）的相转变 Mu噬菌体G片段的倒位 三.免疫球蛋白基因的重排 例（一）λ噬菌体DNA的整合 λ噬菌体的整合酶识别噬菌体和宿主染色体的特异靶位点发生选择性整合； 反转录病毒整合酶可特异地识别、整合反转录病毒cDNA的长末端重复序列(long terminal repeat, LTR)。 否定模板选择复制模型的试验 例（二）细菌的特异位点重组 沙门氏菌H片段倒位决定鞭毛相转变 hix为反向重复序列，它们之间的H片段可在Hin控制下进行特异位点重组(倒位)。H片段上有两个启动子P，其一驱动hin基因表达，另一正向时驱动H2和rH1基因表达，反向(倒位)时H2和rH1不表达。rH1为H1的阻遏蛋白基因。 H2鞭毛素 阻遏蛋白 Hin重组酶 转位片段 hin H2 I H1 H1鞭毛素 hin H2 I DNA 启动序列 H1 启动序列 沙门氏菌H片段倒位决定鞭毛相转变 例（三）免疫球蛋白基因的重排 免疫球蛋白(Ig)，由两条轻链(L链)和两条重链(H链)组成，分别由三个独立的基因族编码，其中两个编码轻链(?和?)，一个编码重链。 轻链的基因片段： 重链的基因片段： L V J C L V D J C 重链(IgH)基因的V-D-J重排和轻链(IgL)基因的V-J重排均发生在特异位点上。在V片段的下游，J片段的上游以及D片段的两侧均存在保守的重组信号序列(recombination signal sequence, RSS)。此重排的重组酶基因rag (recombination activating gene)共有两个，分别产生蛋白质RAG1和RAG2。 CACAGTG(12/23)ACAAAAACC GTGTCCAC TGTTTTTGG 重组信号序列 基因片段 V片段 J片段 RSS RSS 间插DNA OH OH V J 单链切开 RAG1 RAG2 分子内转酯反应 单链切开 转移核苷酸 修复、连接 免疫球蛋白基因重排过程 目 录 四、转座重组 由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)。 由McClintock（1956）在玉米上首先发现遗传学发展