一、生物碱类成分的主要性质及分析特征.ppt

第四章中药制剂中各类化学成分分析 药物分析教研室 第一节 生物碱类成分分析 生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物（如氨基酸、蛋白质和B族维生素等）之外的所有含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共享电子对而大多具有碱性。 生物碱绝大多数具有显著的生物活性,因此中药制剂中有含有生物碱类成分的中药时，常选择该中药含有的生物碱成分作为定性定量的依据。 季铵型生物碱、有氮氧配位键的生物碱易溶于水， 液体生物碱及一些小分子固体生物碱则既溶于水也可溶于有机溶剂。 含有酸性官能团或酯键的生物碱还可溶于一些碱液或热苛性碱液。 二、生物碱类成分分析方法 （一）单体生物碱分析 1、定性鉴别 沉淀反应是生物碱理化鉴别常用方法，主要利用生物碱能与一些试剂生成沉淀这一特性。此反应一般在酸性水溶液中进行。 2、单体生物碱的含量测定 （1）薄层色谱法 此法简便、快捷。选用的吸附剂、展开剂及显色方法与鉴别严格，但比鉴别严格。 （2）高效液相色谱法 可用液-液分配色谱法、液-固吸附 色谱法以及离子交换色谱法。 （3）气相色谱法 （二）中药中生物碱分析 1、总碱分析 （1）定性鉴别 由于中药制剂中成分复杂，有些成分如蛋白质、多肽和鞣质等也可与试剂生成沉淀而造成假阳性结果，因此，制备样品供试液时必须净化处理，除去干扰成分，方能用沉淀反应进行中药制剂中生物碱类成分的鉴别. （2）总生物碱的含量测定 化学分析法 化学分析法包括重量分析法和容量分析法。目前主要使用酸碱滴定法。 强碱滴定生物碱盐时,在70%-90%的乙醇介质中终点比在水中明显,因此常将生物碱盐溶于90%乙醇,再用标准碱乙醇液滴定. 酸碱滴定法指示反应终点可用指示剂和各种电位法。 分光光度法 目前多用单波长光度法，测定波长可选用待测生物碱成分本身的吸收波长，也可加入某些试剂如亚硝酸钠试剂、雷氏盐试剂及酸性染料等反应显色后用可见光波测定。 常用方法：直接测定、离子对萃取比色法 直接测定 不经过化学反应,利用生物碱物质自身的光吸收直接进行比色测定的方法; 一般用于药味较少、干扰不大的中药制剂中总生物碱的含量测定; 2、离子对萃取比色法 酸性染料比色法 应用本法的关键在于介质的pH、酸性染料的种类和有机溶剂的选择; 常用的酸性染料有甲基橙、溴麝香草酚兰（BTB）和溴甲酚绿等； PH的选择要根据染料的性质及生物碱的碱性(pKa)大小来确定; 选择有机溶剂的原则是根据离子对与有机相能否形成氢键以及形成氢键能力的强弱而定. 氯仿、二氯甲烷与离子对形成氢键,有中等程度的提取率,且选择性也较好,故是常 用的提取溶剂. 3、高效液相色谱法 以反相高效液相色谱应用较多。在 反相高效液相色谱中,由于硅胶表面残 留硅醇基的影响,使生物碱分析易产生 保留时间延长、峰形变宽、拖尾.可采 取改进流动相、固定相等措施以克服游 离硅醇基的影响,满足定量定量分析的要求. 中药制剂中生物碱成分时行高效液相色谱法测定时,使用较多的是紫外检测器. 2、各生物碱组分分析 根据总生物碱中各生物碱的性质差异，如碱性差异、极性差异。通常采用色谱法对每种生物碱进行分离后分析 第二节 蒽醌类成分分析 一、概述 中药中醌类化合物主要有苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌四种类型。 其中以蒽醌类化合物最为多见，包括蒽醌及其不同还原程度的产物和二聚物，如蒽酚、氧化蒽酚、蒽酮、二蒽酮、二蒽醌等。 这些化合物在中药中可游离存在，也可与糖结合成苷，称为蒽苷。 第三节 黄酮类成分分析 一、概述 黄酮类化合物（flavonoids）是广泛存在于自然界的一大类化合物。多具有颜色，在植物体内大部分与糖结合成苷，一部分以游离形式存在。 黄酮类化合物最集中的是被子植物，类型最全，结构最复杂，含量也高。由这些中药参与配伍的中药制剂也较多见。 应用示例 双黄连口服液中黄芩苷的含量测定 处方组成：金银花、黄芩、连翘 1、色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）为流动相；检测波长274nm。理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于1500. 2、对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品10mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量，置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含黄芩苷0.1mg）。 3、供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20min，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，