梅毒实验室检测.ppt

梅毒实验室检测 梅毒实验室检测的意义 临床服务 筛查、确定现症梅毒患者； 观察疗效。 流行病学监测 掌握梅毒流行趋势； 了解不同高危人群的梅毒感染率、发病率。 梅毒实验室检测方法 病原学检测 血清学检测 临床表现 取材部位 检测方法 一期梅毒 溃疡、淋巴结、血液 病原学检测、血清学检测 二期梅毒 皮损、淋巴结、血液 病原学检测、血清学检测 三期梅毒 血液 血清学检测 潜伏梅毒 血液、脑脊液 血清学检测 神经梅毒 血液、脑脊液 血清学检测 梅毒实验室检测方法 梅毒病原学检测 原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液 直接涂片，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上，可使梅毒螺旋体折射出亮光。 镀银染色。 梅毒病原学检测的意义 梅毒螺旋体暗视野显微镜检测阳性在临床上可确诊梅毒。此法具有快速，方便，易操作等特点。 ? 若未能发现梅毒螺旋体，不能排除梅毒诊断，需进一步行血清学检测。 感染2周后产生特异性IgM抗体,此型抗体不能通过胎盘；感染4周后出现特异性IgG抗体,可通过胎盘。 另外，TP破坏人体组织，使组织释放一种抗原性心磷脂酶，刺激机体产生反应素，在感染TP后5～7周或出现硬下疳后2～3周转阳性。 梅毒血清学检测 (1)非梅毒螺旋体抗原血清学试验 ---非特异性梅毒抗体 (2)梅毒螺旋体抗原血清学试验 ---特异性梅毒抗体 梅毒血清学检测分类 （1）性病研究实验室试验 (VDRL) （2）血清不加热的反应素玻片试验（USR） （3）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （4）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） 非梅毒螺旋体抗原血清学试验方法 VDRL试验→USR→RPR/TRUST VDRL试验 抗原组成：0.03%心磷脂 0.21%卵磷脂 0.90%胆固醇 抗原需新鲜配制 不能保存 待检血清需灭活 显微镜观测结果 目前主要用于脑脊液检查 USR试验 是VDRL试验的改良 抗原组成：同VDRL，加入乙二胺四醋酸(EDTA) 使抗原可长期保存，能维持一年；另含有氯化胆碱 对血清能起到化学灭活的作用 不必加热灭活 制成试剂盒 使用方便 非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 RPR 在USR试剂成分的基础上 加入黑色碳颗粒 作为沉淀的指示物 用白色的硬纸片替代玻片 TRUST 其原理和成分与RPR试验相同 用红色的甲苯胺红替代了碳颗粒 非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 RPR TRUST 非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。适用于大量人群的初筛。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。 非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点 非梅毒螺旋体抗原血清学试验采用的抗原为心磷脂、卵磷 脂和胆固醇的混合物，所检测的抗心磷脂抗体易见于其他多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕的妇女。 滴度一般小于1：8。 非梅毒螺旋体抗原血清试验假阳性 前带现象 对早期梅毒患者进行非梅毒螺旋体抗原血清试验时，有时血清中存在高浓度的抗体，导致抗原抗体浓度不匹配，出现弱阳性、不典型或阴性反应的结果，此时需将血清稀释后再进行试验，可出现阳性结果，该现象称为前带现象。 非梅毒螺旋体抗原血清试验假阴性 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 梅毒免疫层析快速检测法(RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 梅毒IgM抗体检测（19SIgM） 梅毒螺旋体抗原血清学试验方法 梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 TPPA 其原理和成分与RPR试验相同 用红色明胶颗粒代替羊红细胞 TPHA 梅毒螺旋体致敏羊红细胞，与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应。 + Sheep red cell T.pallidum + Sensitised cell Sensitised cell Specific Antibody Hemagglutination 梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 TP—ELISA试验是用重组梅毒螺旋体抗原包被固相微孔板，加上梅毒血清和单克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合物与酶标记物结合，用酶联检测仪判定试验阳性反应。 梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 FTA-ABS试验是检测梅毒的“金标准”。其原理是将有完整形态的梅毒螺