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- 2017-02-27 发布于河北
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EhM2.2 动物细胞工程
【高考目标定位】
1、动物细胞培养和体细胞克隆
2、动物细胞融合和单克隆抗体
【考纲知识梳理】
一、动物细胞培养
1、原理:细胞增殖
2、过程:
3、结果:获得细胞群
4、传代培养的原因:培养到一定时期细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭。
二、动物体细胞核移植
1、不同细胞全能性的表现程度不同,如:受精卵>>>>
项目 细胞核的移植 概念 利用一个细胞的细胞核(供体核)来取代另一个细胞中的细胞核,
形成一个重建的“合子” 原理 动物体细胞核具有全能性 过程 结果 获得与供体遗传物质基本相同的个体 意义 ①②对物种的优化、濒危动物的保护和转基因动物的扩群有重要意义
③降低畜牧业的成本,缩短育种年限,提高生产效率 三、动物细胞融合与单克隆抗体制备
1、原理:细胞膜的流动性、细胞增殖
2、诱导融合的因素:聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。
3、意义:制备单克隆抗体。
4、单克隆抗体的制备:
(1)过程
[高考资源网] 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用法 植物体细胞杂交
细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、振动,聚乙二醇等试剂诱导 克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性 使细胞分散后诱导细胞融合 除应用植物细胞杂交手段外,再加灭活的病毒诱导 制备单克隆抗体的技术之一 【例1】某同学在学习“细胞工程”时,列表比较了动植物细胞工程的有关内容,你认为有几处是不正确的
植物 动物细胞工程 技 植物 动物细胞培养和融合,单克隆抗体的制备 特殊 机械法去除 胰蛋白酶处理,制成细胞悬液 融合方法 物理方法、化 物理方法、化 典型 人工 单克隆抗体的制备 培 生 愈 动物血清不可缺少 A. B. C. D.
【解析】通过熟记植物细胞工程与动物细胞工程的对比可知,植物细胞工程中去除红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图
(1)图中①所指的是 技术。
(2)图中②所指的物质是 ,③所指的物质是 。
(3)培养重组CHO 细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞严物积累对细胞自身造成危害,应定期更换 。
(4)检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成
【解析】本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、制备单克隆抗体技术。获取目的基因的方法有四种(从基因文库中获取、用PCR扩增技术、用反转录法、用化学合成法)由图以核DNA为模板获得目的基因的方法可知①为PCR技术。进行反转录的模板是mRNA。由题意可知重组CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素(rhEPO),所以重组CHO细胞能过表达出重组人红细胞生成素(rhEPO)或者红细胞生成素。培养动物细胞是用液体培养基——即培养液,细胞从培养液中吸收营养,并同时向培养液中排放代谢废物,当代谢废物积累时会危害细胞,因此要不断更新培养液。制备单克隆抗体是让淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。
【答案】(1)PCR (2)mRNA rhEPO (3)培养液 (4)杂交瘤
(10浙江卷)4.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是培养保留的细胞在瓶壁上可形成多层细胞
克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变
二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
恶性细胞系的细胞可进行付代培养
请回答:
(1)过程①代表的是 。
(2)过程②构建A基因表过载体时,必须使用 和
两种工具酶。
(3)过程③采用的实验技术是 ,获得的X是 。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,
可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。
对该传染病疑似患者确诊时,可以疑似患者体内分离病毒,
与已知病毒进行 比较;或用图中的 进行特异性结合检测。
【解析】
本题以图展示了疫苗的生产和单克隆抗体的制备的过程,考察了中心法则、基因工程
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