质控方法.ppt

质量保证(Quality Assurance,QA) 为一产品或服务满足特定质量要求提供充分可信性所必要的有计划的和系统的措施。 室内质量控制（Internal Quality Control,IQC) 由实验室工作人员，采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度。 室间质量评价 （External Quality Assessment, EQA） 为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位机构客观地评价实验室的结果，发现误差并校正结果 准确度 (accuracy) :待测物的测定值与其真值的一致性程度。 偏倚 (bias) 待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。 精密度(precision) 在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。 重复性条件(repeatability conditions) 是指在短的间隔时间内，在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。 批 (Run) 在相同条件下所获得的一组测定。 均值（Mean） 标准差（Standard deviation, SD) 变异系数（Coefficient of variation, CV） 正态分布(Gaussian distribution) 当一质控物用同一方法在不同的时间重复多次测定，得到一个两头低，中间高，中为所有测定值的均值，左右对称的“钟形”曲线，又称高斯分布。 正态分布的基本统计学含义可用均数、标准差（s）和概率来说明。 诊断敏感性（sensitivity of diagnosis） 是指将实际患病者正确地判断为阳性（真阳性）的百分率。 诊断特异性（specificity of diagnosis） 是指将实际无病者正确地判断为阴性（真阴性）的百分率。 诊断效率（efficiency of diagnosis） 是指能准确区分患者和非患者的能力。 阳性预测值（（positive predictive value, PPV） 是指特定试验方法测定得到的阳性结果中真阳性的比率。 阴性预示值(negative predictive value, NPV) 是指特定试验方法测定得到的阴性结果中真阴性的比率。 标本类型及采集容器 标本采集时间及患者准备 内源性干扰因素 外源性干扰因素 最常用的标本：血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液 。 建议采用真空采血管及蝶形针具，以免直接接触血液。采集容器最好为一次性无菌密闭容器。 标本采集时间及患者准备 激素和治疗药物 感染性病原体抗原、抗体 肿瘤标志物 特定蛋白 可能影响测定结果的标本因素 内源性干扰因素：类风湿因子、补体、异嗜性抗体、治疗性抗体、自身抗体、溶菌酶、磷脂、药物小分子、总蛋白浓度等 外源性干扰因素：溶血、细菌污染、标本贮存时间过长、凝固不全、反复冻融 类风湿因子干扰的排除 稀释标本 改变标记抗体 用变性IgG预先封闭标本中RF 测抗原,可加入还原剂如2-巯基乙醇去除RF 使用特异的鸡抗体IgY作为标记或固相抗体 补体干扰 固相抗体和标记二抗可抗体分子发生变构，从而其Fc段的补体C1q结合位点被暴露出来，这样C1q就成为一个中介物将二者交联起来，从而出现假阳性结果。 固相抗体也会因为活化补体的结合，封闭抗体的抗原表位结合能力，而引起假阴性结果或结果偏低。 补体干扰的排除 56℃ 30min加热可使标本中补体C1q灭活 使用特异的鸡抗体IgY作为标记或固相抗体 异嗜性抗体的干扰 天然的异嗜性抗体（IgG）可分为两类: 可结合于山羊、小鼠、大鼠、马和牛IgG的Fab区域 可结合于小鼠、马、牛和兔IgG的FC区表位，通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。 异嗜性抗体干扰的排除 使用特异的兔F(ab’)2片段作为固相或标记抗体。 在标本或标本稀释液中加入过量的动物Ig，封闭可能存在的异嗜性抗体。但加入量不足或亚类不同时无效。 使用靶特异的非Ig亲和蛋白（Affibody）替代固相或标记抗体之一。采用噬菌体展示技术展示来自单个金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）联合文库的人IgA结合亲和蛋白，用于IgA的测定，不受异嗜性抗体的影响。 使用特异的鸡抗体作为固相和测定抗体。 抗鼠Ig 抗体的干扰 抗鼠抗体对使用鼠源性单克隆抗体的免疫测定，可产生假阳性结果 自身抗体干扰 自身抗体如抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等，能与其相应靶抗原结合形成复合物，在免疫测定方法中可干扰相应抗原抗体的测定。 为避免以上情况出现，可在测定前用理化方法将其解离。 溶菌酶干扰 双抗体夹心法ELISA测定中，溶菌酶可在包被的IgG和