第三章序列对比与数据库搜索(上)辩析.ppt

第三章序列对比和数据库搜索(上) 1 序列对比概述 概念与背景 通过知识的比较分析,获取有用的信息是科学研究中一个最常用和最经典的研究手段,它可以将研究对象相互比较来寻找对象可能具备的特性。 生物信息学中从核酸、氨基酸的一级结构分析序列的相同点和不同点, 能够推测它们的结构、功能以及进化上的联系。 最常用的方法就是序列对比,它为两个或更多个序列的残基之间的相互关系提供了一个非常明确的图谱。 通过比较两个序列之间的相似区域和保守位点,可寻找二者之间可能的分子进化关系。 概念与背景 进一步的对比是将多个蛋白质或核酸同时进行比较,来寻找这些有进化关系的序列之间的共同保守区域、位点和图谱,分析产生共同功能的序列模式。 把蛋白质序列与核酸序列相比较，来探索核酸序列可能的表达框架。 把蛋白质序列与具有三维结构信息的蛋白质相比,从而获得蛋白质空间结构的信息，预测功能。 概念与背景 随着DNA测序方法的飞速发展,序列信息量急增, 使可供比较的序列数量呈现爆炸式增长。将未知序列同整个数据库中的已知序列进行比较分析已经成为一个强有力的研究手段。 序列比较的各种算法发展得也越来越快,也越来越成熟。 序列比较可快速地获得有关序列的大量有价值的参考信息,对于进一步分析其结构和功能有很大的帮助。 对比是数据库搜索的基础，随着生物信息数据和生物学知识大量积累,通过对比方法可以有效地分析和预测一些新发现的基因和蛋白质的功能。 2 序列对比和数据库技术 序列对比原理与理论来源： 序列比对的理论基础是进化学说，如果两个序列之间具有足够的相似性，就推测二者可能有共同的进化祖先。它们是经过序列内残基的替换、残基或序列片段的缺失、以及序列重组等遗传变异过程分别演化而来。 生物物种之间存在进化关系, 对基因和蛋白质序列进行比较,从本质上来讲,是进行进化论一样的比较分析,只不过更加精细,更加详尽。如果两个序列之间具有足够的相似性,就推测二者可能有共同的进化祖先,它们有可能经过序列内残基的替换、残基或序列片段的缺失以及序列重组等遗传变异过程演化而来。 序列对比原理与理论来源： 序列相似和序列同源是不同的概念,序列之间的相似程度是可以量化的参数,而序列是否同源需要有进化事实的验证。 目前大多数对比方法能够在某种程度上建立分子进化的模型。通常假定同源序列是从某一共同祖先不断变化而来,祖先序列在进化过程中分子发生取代、插入以及缺失的变化。 在序列比较中,对同源基因或蛋白质序列相互比较时,残基之间相互对应,可使取代情况很明显地表现出来。 残基一残基对比 在残基一残基对比中,某些氨基酸残基相对于其他位置的残基具有较高的保守性,这些残基对于一个蛋白质的结构和功能是极为重要的。 处于活性位点的残基都是极为保守的,比如形成二硫键的半光氨酸,参与电子传递的氨基酸残基以及决定底物特异性的氨基酸残基。这些保守的残基对于保持蛋白的结构与功能非常重要。 残基一残基对比 要注意某些保守位置对蛋白功能无重要性，只是进化史的反映 。 处理非常相近的物种时要必须十分小心,因为相似性在某些情况下更多地是历史的反映,而不是功能的反映。 例如：Mouse和Rat的某些序列具有高度的相似性,可能仅仅是因为没有足够的时间进行分化而已。 序列对比的误差与相似性标准 序列对比是从已知获得未知的一个十分有效的方法。如通过将一个新的蛋白同其他已知结构功能的蛋白比较,可推断新蛋白的结构与功能。 例如，可得到酶的活性位点残基,形成二硫键的半脱氨酸残基,与配体结合部位的残基及与金属离子结合的残基,形成特定结构motif的残基等。 序列对比的误差与相似性标准 有些保守的残基不一定是结构功能重要的残基，它们可能只是进化历史保留的结构。如果两个序列有显著的保守性,要确定二者具有共同的进化历史,可认为二者有近似的结构和功能。除此之外，还需要更多实验和信息的支持。 通过大量实验和序列对比的分析,一般认为蛋白质的结构和功能比序列具有更大的保守性,如果序列之间的相似性超过30%，认为它们很可能同源。 序列对比的结果只提供了序列进化的理论可能性，还需要实验验证。 3 序列对比的方法学 早期的序列对比是全局的序列比较,但由于蛋白质具有的模块性质,可能由于外显子的交换而产生新蛋白质,因此局部对比会更加合理。 常用打分矩阵描述序列两两对比,两条序列分别作为矩阵的两维,矩阵点是两维上对应两个残基的相似性分数,分数越高则说明两个残基越相似。因此,序列对比问题变成在矩阵里寻找最佳对比路径。 目前最有效的打分方法: Needleman-Wunsch动态规划算法 改良Smith-Waterman算法 SIM算法 在FASTA程序包中可以找到用动态规划算法进行序列对比的工具LALIGN,它能给出多个不交叉的最佳对比结果。 序列