SSR分子标记鉴定青花菜杂交种‘津青一号’的纯度.docVIP

SSR分子标记鉴定青花菜杂交种‘津青一号’的纯度 　　摘 要：以青花菜新品种‘津青一号’及其亲本为试验材料，用SSR分子标记技术鉴定杂交种种子纯度，从50对SSR引物中，筛选出了1对在杂交种和父、母本之间存在显著差异的引物（L21），该引物扩增片段电泳条带清晰可辨，且杂交种含有父、母本的特异互补带型。利用该引物对108株‘津青一号’杂交种进行纯度鉴定，结果为96.30%，与大田形态鉴定结果98.15%相比，SSR标记与大田种植鉴定结果基本一致。这表明，引物L21可用于‘津青一号’的纯度鉴定。 　　关键词：青花菜；SSR；种子纯度鉴定 　　中图分类号：S635.3 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2016. 　　Hybrid Purity Identification of Broccoli Variety ‘Jinqing No.1’ Using SSR Method 　　JIANG Hanmin， WEN Zhenghua， LIU Lili， SHAN Xiaozheng， SUN Deling 　　（Key Laboratory of Vegetable Germplasm Resources Innovation，Tianjin Kernel Vegetable Research Institute，Tianjin 300384，China） 　　Abstract： In this paper， broccoli hybrids， Jinqing No.1 and its parents were used as plant materials，SSR molecular marker was used to analysis the polymorphism of these materials. Among the 50 pairs of SSR primers screened，one pair of primers（L21） had significant and legible differences between hybrid seeds and their parents. 108 individual seeds were tested with the primer， and the seed purity was 96.30%， which was closed to the result identified in the field of 98.15%.The results indicated SSR primer L21 could be used to detect the purity of Jinqing No.1. 　　Key words： Broccoli； SSR； seed purity identification 　　青花菜（Brassica oleracea L.var.italica），又名西兰花、青花椰菜等，属于十字花科芸薹属1、2年生草本植物。青花菜以主茎及侧枝顶端形成的绿色花球为食用部位，营养物质丰富，无论色泽、口感都备受青睐，深受广大群众所喜爱。 　　在青花菜的种植生产中，青花菜杂交种子的纯度在很大程度上影响了品质和产量。在种子生产中，由于一些不可避免的因素混入自交产生的F1代种子或劣质种子及一些其他品种的杂交后代，从而导致生产出的种子纯度不高。在种子市场上，不法商贩销售的假冒种子在很大程度上也降低了种子的质量。保证杂交种子的纯度及优良品质，成为确保青花菜市场供应优质青花菜的一个重要前提。鉴定种子纯度的传统方法是大田形态学鉴定，该方法在鉴定周期和鉴定费用上有其局限性，且形态观察的准确度难以保证。分子标记技术的出现使种子在分子水平上的鉴定成为可能。分子标记技术在种子鉴定方面的应用，节省了鉴定的时间和成本。SSR是DNA分子标记中的一种，是以PCR为基础的技术，多态性高，成本较低，标记呈显性和共显性，操作较易实现，重复性较好[1]。有研究报道，利用SSR分子标记技术能准确鉴定青花菜种子的纯合度[2]。此外，SSR分子标记也已经应用到其他经济作物种子纯度的鉴定，包括水稻、油菜、大豆、玉米等[3-10]。 　　本研究以津青一号及其父、母本为研究材料，利用SSR分子标记进行筛选，以期得到能产生特殊标记的引物，在检验该引物可靠后将其运用到杂交种子的鉴定中，供杂交种子在分子水平鉴定借鉴。 　　1 材料和方法 　　1.1 材 料 　　试验材料为11DR-100（父本）、10FS-2（母本）、津青一号（F1代）。 　　1.2 SSR鉴定种子纯度的评价 　　1.2.1 全基因组DNA提取 以改