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第三节 电子传递和氧化呼吸链 一、生物氧化概述 (一)生物氧化的特点 生物氧化和有机物在体外氧化(燃烧)的实质相同,都是脱氢、失电子或与氧结合,消耗氧气,都生成CO2和H2O,所释放的能量也相同。但二者进行的方式和历程却不同: (二)CO2的生成 (三)H2O的生成 生物氧化的三个阶段 二、电子传递链(呼吸链) (一)线粒体结构 (二)线粒体呼吸链 呼吸链上很多电子载体的顺序通过多种研究得以阐明 方法一:测量标准还原电位(?E’0) 电子倾向于从低还原电位(?E’0)的载体流向还原电位高的载体(不过在真正的细胞中可能有偏差) (三)呼吸链的组成 1.NADH-Q还原酶(NADH脱氢酶、复合体Ⅰ) 铁硫蛋白 2. CoQ 3. 琥珀酸-Q还原酶(复合体Ⅱ) 琥珀酸脱氢酶也是此复合体的一部分,其辅基包括FAD和Fe-S聚簇。 琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸氧化为延胡索酸,同时其辅基FAD还原为FADH2,然后FADH2又将电子传递给Fe-S聚簇。 最后电子由Fe-S聚簇传递给琥珀酸-Q还原酶的辅酶CoQ。 琥珀酸 FADH2 Fe-S CoQ 4.细胞色素还原酶 (细胞色素bc1复合体、复合体Ⅲ) 含有两种细胞色素(细胞色素b、细胞色素c1)和一铁硫蛋白( 2Fe-2S )。 细胞色素bc1复合体的作用是将电子从QH2转移到细胞色素c 细胞色素(cytochrome, cyt) 5.细胞色素c 在复合体III和Ⅳ之间传递电子。(细胞色素c 交互地与细胞色素还原酶的C1和细胞色素氧化酶接触) 是唯一能溶于水的细胞色素。 相对分子质量为13000,由104个氨基酸构成的单一肽链。 6. 细胞色素氧化酶 (复合体Ⅳ、细胞色素c氧化酶 ) 由 cyta和a3 组成。复合物中除了含有铁卟啉外,还含有2个铜原子(CuA,CuB)。Cyta与CuA相配合,cyta3与CuB相配合,当电子传递时,细胞色素的Fe3+ 、 Fe2+间循环,同时Cu2+ 、 Cu+间循环,将电子从cytc直接传递给O2,也叫末端氧化酶。 NADH呼吸链 电子传递链标准氧化还原自由能变化 (五)电子传递 抑制剂 概念:能够阻断呼吸链中某部位电子传递的物质称为电子传递抑制剂。 电子传递抑制剂的使用是研究呼吸链中电子传递体顺序的有效方法。(阻断部位物质的氧化-还原状态可以测出) 电子传递 抑制剂 第四节 氧化磷酸化作用 磷氧比( P/O ) 二、氧化磷酸化的偶联机理 线粒体ATP合酶复合体组分 氧化磷酸化重建示意图 三、化学渗透假说(chemiosmotic hypothasis) 化学渗透假说原理示意图 线粒体电子传递和H+排出的数目和途径 Boyer和Walker的工作 ATP合酶结构示意图 ATP酶作用机理 四、 线粒体外NADH的氧化磷酸化作用 ?-磷酸甘油穿梭 苹果酸-草酰乙酸穿梭作用 2,4-二硝基苯酚的解偶联作用 离子载体(离子载体抑制剂) 是一类脂溶性物质,能与H+以外的其他一价阳离子结合,并作为他们的载体使它们能够穿过膜,消除跨膜的电位梯度。 缬氨霉素(K+) 短杆菌肽(K+ Na+) 五、葡萄糖彻底氧化生成ATP的总结算 合成一个ATP分子是由3个H+通过ATP合酶所驱动,多余的一个H+ ,可能用于将ATP从基质运往膜外细胞溶胶。因此一对电子从NADH传至02,所产生的 ATP分子数是2.5个。 在细胞色素还原酶的水平进入电子传递链的电子,如琥珀酸,或细胞液中的NADH,它们的电子对只产生1.5个ATP分子。这样,当一分子葡萄糖彻底氧化为CO2和水所得到的ATP分子数和过去传统的统计数(38个ATP)少了6(或8)个ATP分子,成为32(或30)个。 六、能 荷 其它末端氧化酶系统 问答题 定子 旋转催化理论认为质子流通过Fo引起亚基III 寡聚体和?及?亚基一起转动,这种旋转配置? /?亚基之间的不对称的相互作用,引起催化位点性质的转变, ?亚基的中心? -螺旋被认为是转子,亚基I和II与?亚基组合在一起组成定子,它压住? /?异质六聚体. ? ? ? OSCP ? F1 H+通道 ? ? ? ? FO 柄 DCCD结合蛋白 基质表面 外表面 ? Rotation of the g subunit and the ring of c subunits in the F0F1 complex was observed by in vitro studies using fluorescence microscopy 肌动蛋白 ATP合成 L态:低亲和力态,ATP合成 O态:开放态,亲和力极低,ATP释放 T态:紧
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