01油镜的使用和细菌的简单染色法课稿.ppt

实 验 一油镜的使用和细菌的简单染色方法 目的 1、了解油镜的基本原理，掌握油镜的使用方法 2、掌握细菌的简单染色方法及相关无菌操作技术 1.用油镜时，勿将镜臂弯曲倾斜，以免油滴或菌液流淌外溢，影响观察造成污染。 2.用低倍镜对光，同时调节集光器和光圈以获得最适亮度。染色标本油镜检查时，应将光圈完全打开，集光器上升至载物台相平，使光亮度很强。 3.标本片放在载物台上，用压片夹固定。  4.低倍镜找出标本的范围，然后在待检部位上加一滴香柏油，转动镜头转换器，将油镜头置于工作位置，从侧面观察并缓慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，然后眼睛移至目镜，缓慢向上移动粗调节器,待看到模糊物象时，再用细调节器转动至物象完全清晰为止; 5.观察完毕，取下标本片，立即用擦镜纸顺一个方向旋转擦拭镜头上的油。若油已干，应先用二甲苯滴在擦镜纸上擦净镜头，再用另一干净擦镜纸拭去镜头上沾有的二甲苯; 6.显微镜擦净后，降低物镜并将其转成八字形，集光器下降，光圈关上，关闭电源，罩上显微镜罩 油镜使用注意事项 油镜的识别：油镜头上都有标记；标有100×；镜头前端有黑、白或红色的圆圈；刻有“III”或Oil等，其入光孔径也较其他物镜小； 油镜头使用后应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。注意在擦拭时，要求顺一个方向旋转擦，不能两个方向来回擦； 取送显微镜时，应右手持镜臂，左手托镜座，平端于胸前。 不用时，将接物镜转开呈“八”字状，集光器下降，罩上镜罩。对号归位。 原理 实验材料 菌种 产气杆菌营养琼脂斜面培养物； 金黄色葡萄球菌营养琼脂斜面培养物 试剂 结晶紫染液、石炭酸复红染液、香柏油、二甲苯、无菌水 仪器及其它 显微镜、酒精灯，载玻片，接种环，擦镜纸等。 实验流程 制备细菌染色装片 油镜观察 实　验　步　骤 1、 用简单染色法制备细菌染色装片 涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥 2 使用油镜观察细菌染色装片 低倍镜 高倍镜 油镜 实验结果 绘图 普通光学显微镜Ⅰ 显微镜的构造 1.光学部分:接目镜 、 接物镜 、 照明装置(聚光镜、 虹彩光圈、 反光镜等). 它使检视物放大,造成物象. 2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件.它起着支持 调节 固定等作用. 普通光学显微镜Ⅱ 显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。 ?：可见光的波长（平均0.55?m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率。 ?：镜口角（即入射角）。 普通光学显微镜Ⅲ 油镜使用的原理 油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 * * 1.油镜的使用与保护 油镜原理示意图 光线从标本玻片经空气进入镜头时，由于介质密度不同而发生折射现象，因此进入物镜中的光线很少，结果视野很暗，物像不清晰。如在玻片上加上折光率和玻片(n=1.52)相近的香柏油(n＝1.515)，就可避免光线的分散，加强视野的亮度，获得清晰的物像 油镜的使用方法 细菌简单染色法的原理 　　　细菌的细胞小而透明，在普通的光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色。利用单一染料对细菌进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。此法操作简便，适用于菌体一