- 1、本文档共42页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
血清总蛋白、白蛋白测定(serumtotal
(二)电泳法 醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳。 特异性高,准确性不够,操作烦琐费时,且不宜用自动生化分析 (三)染料结合法 根据白蛋白结合外源性染料的能力比球蛋白大,故在不分离白、球蛋白的条件下用染料直接测定白蛋白。 有干扰,但灵敏度高、操作简便、重复性好,自动生化分析仪常用的方法。 * * 血清总蛋白、白蛋白测定(Serum total protein、Albumin test) 临床生物化学: 是研究机体健康和疾病的生物化学过程。测定体液或组织中的成份以提供对疾病的诊断、治疗和预防。 所用样品: 血液(血清/血浆)、尿液、脑脊液及体液 测定方法: 凯氏定氮法、双缩脲法、酚 试剂法、紫外分光光度法、染料 结合法、比浊法等。 总蛋白测定(一)、?? 凯氏定氮法 历史悠久,它是根据蛋白质平均 含氮量16%来计算蛋白质浓度的。 结果准确,但方法复杂 标化血清 检验其他方法 (二)、?? 双缩脲法 蛋白质中的肽键在碱性环境中能与铜离子作用产生紫红色络合物。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性环境中与铜离子作用产生紫红色络合物的反应相似,故称为双缩脲反应。 简单、精密、准确,为临床首选的常规方法,但灵敏度稍差。 (三)、?? 酚试剂法 运用蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基能还原磷钨酸-磷钼酸试剂生成钼蓝来测定蛋白质的浓度。 改良法:在酚试剂中加入碱性铜离子。集中了双缩脲法和酚试剂法的优点 灵敏度高,但受许多还原物质的干扰,限制了它在临床上的应用。 (四)、?? 紫外分光光度法 蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处有一吸收峰,可用于蛋白质含量的测定。 准确性差,但因未加任何试剂和处理,可保留其生物活性且可回收全部蛋白质,故可用于较纯的酶和免疫球蛋白测定。 (五)?? 染料结合法 在酸性环境下,蛋白质分子带正电,可与带负电的染料结合产生颜色而测定之。 重复性好、灵敏度高,BCG 法特异性不高。 (六)?? 比浊法 某些酸(如三氯醋酸、磺基水杨酸)能与蛋白质结合产生微细沉淀,测定悬浮液的浊度即可求得蛋白质的含量。 简单、试剂易得,但影响因素太多。 血清总蛋白双缩脲测定法一、原理:蛋白质中的肽键(-CONH-)在碱性环境中能与铜离子作用产生紫红色络合物。 此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性环境中与铜离子作用产生紫红色络合物的反应相似,故称为双缩脲反应。 颜色的深浅在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比,经与同样处理的蛋白标准液比较,即可求得蛋白质含量 郎伯-比耳定律:——溶液的吸光度与溶液浓度成正比 A1 = lgI0 / I = K1C1L1, A2 = lgI0 / I = K2C2L2 由于 分析物质相同,处理一样,比色皿也相同, 故 A1 / A2 = C1 / C2, 则 C1 = × C2 A1 A2 二、主要试剂: 双缩脲试剂( NaOH 、硫酸铜、 酒石酸钾钠、碘化钾) 蛋白标准(60 g/L) 三、操作步骤加入物(ml) B S×2 U×2血清 / / 0.05标准液 / 0.05 /双缩脲试剂 3.0 3.0 3.0 混匀,37℃,10分钟,540nm处比色,1cm光径比色杯,B管调零 注: 1.非严重黄疸、脂血及高脂血 症血清不用做血清自身对照管。 2.可以用蒸馏水调零,目的是检 验各个试剂的好坏 四、结果 Au 血清总蛋白(g/L) = —— X 60 As 五、正常参考范围 60-80g/L 六、临床意义1、? 总蛋白浓度升高(1)蛋白质合成增加:大多见于多发性 骨
您可能关注的文档
- 虚拟太阳天文台技术回顾-china.ppt
- 虚拟语气(subjectivemood).ppt
- 需求侧管理与有序用电二о一三年六月.ppt
- 需求而设计的一种简单易行的管材切断工艺装备.设计要求.ppt
- 需要储蓄多少钱才能安心退休.ppt
- 徐志摩中國的雪萊.ppt
- 徐州市教育局开展一师一优课、一课一名师.ppt
- 许多情况下,一个在纸上设计得非常完美的电源可能在初次.ppt
- 续作工作项目评估报告工作项目名称国土资源重点.ppt
- 旋卓穹庐学塞人。化尽素衣冬未老,石烟多似洛阳川。.ppt
- 2023学年诸暨中学高三年级第二学期3月第二次模拟考试(政治)公开课教案教学设计课件资料.docx
- 运动的合成与分解(二)公开课教案教学设计课件资料.pptx
- 近五年浙江省各地图形的翻折(轴对称)原题公开课教案教学设计课件资料.doc
- 如何做教师-2019-11-13-中关村一小相关公开课教案教学设计课件资料.pptx
- 生活中的圆周运动 (水平面)正式版公开课教案教学设计课件资料.pptx
- 专题10 条件概率与全概率公式公开课教案教学设计课件资料.docx
- 金华市东阳市2019学年第二学期期末测试卷公开课教案教学设计课件资料.doc
- 5 琥珀(第二课时)【慕课堂版】公开课教案教学设计课件资料.pptx
- 项目五 打印米老鼠模型公开课教案教学设计课件资料.ppt
- (打印版)9月25日地理周练公开课教案教学设计课件资料.docx
文档评论(0)