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沙棘半家系及果实不同成熟期果肉含油量变化 　　摘要：沙棘（Hippophae rhamnoides L.）油富含100多种对人体有益的生物活性物质，但沙棘果肉与种子的含油量均较低，所以提高沙棘含油量的遗传改良一直是沙棘育种的目标。利用微量提取法分别测定了1个沙棘半家系和2个沙棘品种果实不同成熟期的果肉含油量。结果表明，BHi727115半家系不同F1代个体间干果肉含油量存在显著差异，介于12.64%～26.94%，平均值为20.15%（n=59）；BHi72715和BHi72782品种的干果肉含油量分别介于21.08%～25.09%与20.43%～25.72%；在果实不同成熟期，果肉含油量变化在不同品种间存在明显差异。首次分析了沙棘半家系果肉含油量的变异，可为沙棘育种提供科学依据；不同成熟期的研究结果则可为沙棘果实的采收与加工利用提供参考。 　　关键词：沙棘（Hippophae rhamnoides L.）；果肉含油量；半家系；不同成熟期；微量提取法 　　中图分类号：S793.6+5 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）16-4187-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.16.029 　　沙棘（Hippophae rhamnoides L.）为胡颓子科（Elaeagnaceae）沙棘属（Hippophae L.）灌木或小乔木，是重要的经济林和水土保持植物。沙棘果富含190多种生物活性物质[1，2]，如多种不饱和脂肪酸[3]、黄酮类化合物[4]、甾醇类[5]、糖类[2]、维生素类与氨基酸[2，6]等，有高原“圣果”之美誉。被称为21世纪人类食用油的沙棘油富含胡萝卜素、生育酚、叶绿醌、甾醇、多不饱和脂肪酸（棕榈油酸、棕榈酸、油酸、亚油酸和亚麻酸[7]等）以及维生素E、维生素K等生物活性物质[8]，在治疗癌症[9]、肿瘤、心脑血管病[10]、消化系统病[11]、烧伤、溃疡等疾病中有良好疗效。沙棘种子含油量为9.8%～19.5%、干果肉含油量为2.02%～34.26%，而鲜果肉含油量则仅为1%～5%。目前全球沙棘油年缺口超过1 200 t，改良与提高其含油量是解决这一巨大缺口的惟一方法。曾有研究者报道沙棘不同品种干果肉含油量的差异，但对干果肉含油量随果实不同成熟期的变化研究较少，且未见沙棘半家系种群干果肉含油量的相关报道。 　　索氏提取法是世界范围内植物油脂提取应用最广泛的方法，也是油料提取的第一标准方法[12]，但索氏提取法所需原料较多，耗时[13]，不利于开展大样品、小材料的研究工作。微量提取法是通过萃取的原理基于少量样品进行的油脂提取方法[14]，在其他油料植物上已被广泛采用[15]。试验采用微量提取法对沙棘半家系和果实不同成熟期干果肉含油量变化进行了分析，旨在为沙棘育种、采收与加工利用提供科学依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　用于果肉含油量变化研究的沙棘（H. rhamnoides L. subsp. mongolica Rousi）果实来自瑞典农业大学Balsgard北欧果树和浆果种质中心。其中，BHi727115半家系种群的F1代59个个体的果实于2011年果实成熟期采集，59个个体的母本同为BHi727115，父本不同（自由传粉）。另2个品种BHi72715和BHi72782果实不同成熟期的沙棘果实分别于2011年8月的3、6、9、12、15、18、21、24、27、30日和9月的2、5、8日采收。采后立即放入-20 ℃冰箱里保存。 　　1.2 样品制备 　　将在-20 ℃下冰冻的果实于冰上纵切，剥离种子，将果肉于液氮研磨，研磨后置于-50 ℃真空冷冻干燥器内干燥10 d左右，冻干后将干粉置于真空干燥器内保存。利用微量提取法提取油脂前，将样品置于60 ℃烘箱内烘至恒重。 　　1.3 微量提取法 　　称取大约0.2 g样品于1.5 mL的离心管内，加入1 mL的氯仿∶甲醇（2∶1，V/V）溶液和200 μL的玻璃珠，在漩涡混合仪上混匀1 min，放置1 min，连续5次。于4 ℃冰箱放置2 h。7 000 r/min离心2 min，取上清液到新的离心管里，加入300 μL 1%的KCl溶液混匀。7 000 r/min离心1 min，把氯仿相（下层）转移到已知重量的新的离心管中。真空干燥器中挥发溶剂，24 h称重1次，直至重量相差小于0.1 mg，记录数据并计算含油量。 　　1.4 半家系与品种果实不同成熟期果肉的含油量 　　利用微量提取法测定BHi727115半家系59个个体、BHi72715和BHi72782 2个品种果实各13个不同成熟期的干果肉含油量，每个样品设5次重复。利用SPSS软件分析半