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荸荠花粉活力测定及贮藏寿命研究 　　摘要：为了解荸荠[Heleocharis dulcis （Burm. f.）Trin. ex Hensch.]花粉生活力和最佳体外萌发条件，分别采用I2-KI、TTC、MTT染色法和离体培养基萌发法对荸荠花粉活力进行了测定，并初步研究了荸荠花粉在常温（25 ℃）条件和低温（4 ℃）贮藏条件下活力变化的动态。结果表明，MTT染色法测定结果与离体萌发法最接近，最适宜荸荠花粉活力的快速检测；离体萌发法适宜培养基配方为1%蔗糖+50 μg/mL硼酸；荸荠花粉在常温条件下50 min活力降至0.29%的低水平，在低温条件下5 h后完全失去活力。 　　关键词：荸荠[Heleocharis dulcis（Burm. f.） Trin. ex Hensch.]；花粉活力；测定方法；贮藏寿命 　　中图分类号：S645.3+42 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）10-2564-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.10.028 　　Abstracts： To study the pollen viability and in vitro germination conditions of Heleocharis dulcis（Burm. f.） Trin. ex Hensch.， viability of H. dulcis pollen was determined by three testing staining methods including I2-KI， TTC， MTT and in vitro culture method. Dynamic changes of in vitro pollen germination rate under the storage condition of 25 ℃ and 4 ℃ was compared. The result indicated that the pollen dyed rate of MTT staining method was similar to the in vitro germination rate， thus the MTT staining method is suitable for fast test of the pollen viability of H. dulcis. The best medium for in vitro pollen germination of H. dulcis was 1% sucrose + 50 μg/mL boric acid. The in vitro pollen germination rate of H. dulcis decreased to 0.29% when stored at 25 ℃ for 50 min， while decreased to 0 when stored at 4 ℃ for 5 h. 　　Key words： Heleocharis dulcis （Burm. f.）Trin. ex Hensch.； pollen viability； determination method； storage life 　　荸荠[Heleocharis dulcis（Burm. f.）Trin. ex Hensch.]为莎草科（Cyperaceae）荸荠属（Heleocharis R. Br.）多年生草本植物，其以球茎供食用，生食、熟食皆宜，是一种重要的水生蔬菜之一。目前，中国荸荠栽培面积约为3.5万hm2，年产量75万t左右[1]，荸荠栽培对于农民增收、农业增效发挥了重要作用。国内各地荸荠产区栽培的荸荠品种多为地方品种，鲜见有荸荠选育品种；荸荠育种多利用自然变异采用单株系选的方法进行，或者利用荸荠组织培养过程中产生的变异经单株选育而成，育种方法单一。开展荸荠人工杂交育种研究已成为业内共识，但相关报道较少。荸荠花粉活力高低对杂交育种成败和效率有着重要的影响，在荸荠杂交前进行荸荠花粉活力测定和花粉贮藏寿命调查，可有效提高杂交效率。目前尚未见荸荠花粉测定方法和花粉保存寿命研究的报道，为此课题组开展了荸荠花粉活力测定方法比较试验，同时观察和分析荸荠花粉在离体室温（25 ℃）和低温（4 ℃）条件下的活力变化规律，以期为荸荠杂交育种提供基础资料。 　　1 材料与方法 　　1.1 样品采集 　　荸荠花粉采集于湖北地方品种沙洋荸荠，在早晨8：00采集花药完全伸出小花、但尚未散粉的花序若干，迅速带回实验室，用镊子捏取荸荠花序中部花药1个，置于载玻片上静置20 min，