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- 2017-03-05 发布于安徽
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专题5 DNA和蛋白质技术 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段学业分层测评
(建议用时:45分钟)
[学业达标]
1.PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。下列防止污染的方法中不正确的是( )
A.将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行
B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头小套、小离心管应一次性使用,以免交叉污染
C.所有PCR试剂都应放置于大瓶分装,以减少重复加样次数,避免污染机会
D.PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱
【解析】 所有的PCR试剂都应放置于小瓶分装,一次性用完,避免因多次使用造成污染。
【答案】 C
2.DNA的复制需要引物,主要原因是( )
A.可加快DNA的复制速度
B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合
C.引物的5′端有助于DNA聚合酶的延伸DNA链
D.DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链
【解析】 DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA,而只能从3′端延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。
【答案】 D
3.下列属于PCR技术的条件的是( )
①单链的脱氧核苷酸序列引物 ②目的基因所在的DNA片段 ③脱氧核苷酸 ④核糖核苷酸 ⑤DNA连接酶 ⑥耐热的DNA聚合酶 ⑦DNA限制性核酸内切酶
A.①②③⑤ B.①②③⑥
C.①②③⑤⑦ D.①②④⑤⑦
【解析】 PCR技术的条件:模板,本题为第②项;引物,本题为第①项;原料,本题为第③项;酶,本题为第⑥项。
【答案】 B
4.下列有关PCR技术的叙述,不正确的是( )
A.PCR技术利用的是碱基互补配对原则
B.PCR技术可用于基因诊断、判断亲缘关系等
C.PCR技术需在体内进行
D.PCR技术可能为变性、复性、延伸三个阶段
【解析】 PCR技术是聚合酶链式反应的简称,是在体外快速大量复制DNA片段的一种新技术。
【答案】 C
5.下图是PCR反应过程中哪次循环的产物( )
【导学号
A.第一次循环 B.第二次循环
C.第三次循环 D.第四次循环
【解析】 在PCR反应中,以引物为标记,第一次循环时加入的DNA为模板,两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸,所以形成的每个子DNA中只有一种引物;从第二次循环开始,上次产生的含引物的DNA分子单链又可作为模板,形成的DNA分子两端均含引物。
【答案】 A
6.下列有关PCR技术的说法中,不正确的是( )
A.PCR技术是在细胞内完成的
B.PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术
C.PCR技术的原理与DNA复制的原理相同
D.PCR技术的前提是有一段已知的目的基因的核苷酸序列
【解析】 PCR技术是在生物体外进行DNA复制的技术,其原理与DNA复制的原理相同,但前提是必须要有一段已知的目的基因的核苷酸序列和根据核苷酸序列合成的引物。
【答案】 A
7.PCR实验中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是( )
A.反复洗涤 B.用酒精擦洗
C.高压灭菌 D.在-20 ℃储存
【解析】 为了避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。PCR所用的缓冲溶液和酶应分装成小份,并在-20 ℃储存。使用前,将所需的试剂从冰箱内拿出,放在冰块上缓慢融化。故选C。
【答案】 C
8.PCR操作过程中,对于温度的控制,应当控制在( )
A.37 ℃
B.室温
C.80 ℃
D.先为95 ℃,然后降至55 ℃,最后调至72 ℃
【解析】 利用PCR技术体外扩增DNA时,不需要解旋酶,而是通过加热破坏双螺旋结构。然后再降温至55 ℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
【答案】 D
9.右图表示DNA变性和复性示意图,相关说法正确的是( )
A.向右的过程为加热(50~60 ℃)变性的过程
B.向左的过程是DNA双链迅速致冷复性
C.变性与在生物体内解旋过程的实质相同
D.图中DNA片段共有8个游离的磷酸基、8个3′端
【解析】 DNA体外的变性同体内的解旋实质是相同的,都是使氢键断裂,DNA双螺旋打开,只是体内需解旋酶,体外是高温条件。
【答案】 C
10.在进行DNA亲子鉴定时,需大量的DNA。PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增,获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半
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