实验九RNA含量的测定（苔黑酚法）Exp.9Quantitative.ppt

实验九 RNA含量的测定(苔黑酚法）Exp.9 Quantitative Determination of RNA by the Orcinol Reaction  一、实验原理 当RNA与浓盐酸共热时，即发生降解，RNA分子中的核糖基转变成α-呋喃甲醛，后者与3，5-二羟基甲苯（苔黑酚）反应，在高铁离子的催化下可反应生成绿色物，反应产物在670nm处有最大吸收。在10～100μg/ml范围内其光密度值与RNA浓度有线形关系，可用比色法测定。 二、实验用品 1、材料 粗制RNA 2、试剂 （1）标准RNA母液：准确称取RNA 10.0mg，用少量蒸馏水溶解（如不溶，可滴加浓氨水，调pH7.0），定容至10.0ml，此溶液每ml含有RNA 1mg。 （2）标准RNA溶液：取母液1.0 ml，置10ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，此溶液为100μg /ml 。 （3）样品溶液：将一定量的RNA粗品用蒸馏水溶解并定容，RNA浓度在 10～100μg/mL范围内。 （4）苔黑酚-三氯化铁试剂：将100mg苔黑酚溶于 100ml浓盐酸中，再加入100mg Fecl3?6H2O，临用时配置。 3、仪器设备 分