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工业生物技术产业与生物加工技术
第二篇 发酵机制 第三章 糖嫌气性发酵产物积累机制 第四章 柠檬酸发酵机制 第五章 氨基酸发酵机制 第六章 核酸类物质的积累机制 第七章 抗生素的生物合成机制 发酵机制:微生物通过其代谢活动,利用基质合成人们所需要的代谢产物的内在规律。 发酵机制研究的内容: 1.微生物的生理代谢规律(就是各种代谢产物合成途径及代谢调节机制); 2.环境因素(营养条件、培养条件等)对代谢的影响及改变代谢的措施; 代谢控制发酵:人为改变微生物的代谢调控机制,使有用的中间代谢产物积累。 第三章 糖嫌气性发酵产物积累机制 重点:糖酵解途径的特点;酒精发酵机制;甘油的合成机制;乳酸发酵机制; 难点:糖酵解的调节机制;酒精发酵中副产物的生成; 第一节 糖酵解途径及调节机制 糖酵解途径:1940年弄清全过程 葡萄糖分解为丙酮酸,在不同的微生物丙酮酸再生成不同的产物,如乙醇、乳酸、柠檬酸等。 总反应: C6H12O6+2ADP+2Pi+2NAD= 2CH3COCOOH+2ATP+2NADH2 一、糖酵解途径的特点: 1.是除兰绿藻外的几乎所有生物葡萄糖分解的共同途径,广泛存在于各种细胞中,每个反应都不需要氧参与。 2.分为两个阶段,即准备阶段(六碳糖变为三碳糖,消耗2个ATP)和(第二阶段从三碳糖开始生成丙酮酸,产生4个ATP)。 3.糖酵解有10多个反应组成,每个反应都在酶的作用下完成(激酶、变位酶、异构酶、脱氢酶四类); 4.其他糖类(如淀粉、乳糖等)作为碳源和能源时,是通过葡萄糖或其他中间产物并入糖酵解途径的。 5、在不同的有机体和不同条件下,H2的受体不同,因此丙酮酸的去路也不同。 根据主要代谢产物的不同,将微生物通过EMP途径发酵分为下列六种类型: 如(图3-2) 1.酵母的乙醇发酵 2.同型乳酸发酵(乳酸菌) 3.丙酸发酵(丙酸菌) 4.混合酸发酵(大肠杆菌) 丁酸发酵 5.丁酸型发酵 丙酮-丁醇发酵 丁醇-异丙酮发酵 二、糖酵解调节机制 调节点主要是三个激酶:己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶,所催化的三个反应是不可逆的,只参与糖酵解,不参与糖的新生。而激酶的活性是受细胞能荷调节的。 (ATP+?ADP)∕(ATP+ADP+AMP) 为一定比例,该比例叫能荷。 ATP含量高时,抑制磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶,酵解减少;反之,酵解加快。 无机磷也是调节者,它能解除6-磷酸葡萄糖对己糖激酶的抑制,加快糖酵解。 第二节 酒精发酵机制 一、酒精生成机制 以丙酮酸脱羧酶产生的乙醛作为氢受体(乙醇脱氢酶作用):丙酮酸脱羧酶 乙醇脱氢酶 丙酮酸 CO2+乙醛←←→→乙醇 NADH+H+ NADH+ 以上是酵母酒精发酵(Ⅰ型发酵)。 总反应: C6H12O6+2ADP+2H3PO4= 2CH3CH2OH+2ATP+2CO2+104.6kJ 理论转化率计算: 2*46.05/180.1=51.1% 二、巴斯德效应 指:在好气条件下,酵母菌发酵能力下降(细胞内糖代谢降低,乙醇积累减少);不仅存在于酵母中,也存在于具有呼吸和发酵能力的其他细胞中。 机制:好气条件下,糖代谢进入TCA环 → 柠檬酸↑、ATP↑ → 抑制磷酸果糖激酶的合成和活性 → 6-P-葡萄糖↑(积累)→ 反馈抑制己糖激酶 → 抑制葡萄糖进入细胞内 → 葡萄糖利用降低。另外,好气条件下,丙酮酸激酶的活性也降低,糖酵解速度下降。 三、酒精发酵中的副产物 副产物的生成消耗糖也影响产品质量 主产物:乙醇、CO2 醇类(杂醇油) 酵母酒精发酵 醛类(糠醛) 酸类(琥珀酸) 酯类 1.杂醇油的形成: 碳原子大于二的脂肪族醇类的统称,包括正丙醇、异丁醇、异戊醇等,构成酒类的风味。 1)酒精发酵中高级醇形成的途径: ①氨基酸氧化脱氨作用: 亮氨酸+ α-酮戊二酸 α-酮异己酸+谷氨酸 α-酮异己酸 异戊醛 异戊醇 由此机制可知,亮氨酸产异戊醇;苯
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