蔬菜的种子生产教材.ppt

（一）脱毒苗的生产 （二）微型脱毒种薯原原种（微型薯）的生产 （三）常规脱毒原原种生产技术 （四）马铃薯生产用种薯的生产 二、马铃薯脱毒种薯生产环节及技术 1、茎尖脱毒材料的选择； 2、高温处理钝化病毒及催芽； 3、培养基的制备； 4、茎尖组织剥离和接种； 5、组织培养； 6、病毒检测； 7、脱毒苗快繁 （一）脱毒苗的生产 1、茎尖脱毒材料的选择 要在推广优良品种中选择健壮并具有本品种典型性状的单株，作为茎尖脱毒的材料。 2、高温处理钝化病毒及催芽 将渡过休眠后的入选种薯材料，放在30℃ ～40 ℃的条件下，经30天左右，一方面可有效降低花叶病毒的浓度，提高脱毒成功率；另一方面，也同时进行了室内催芽。 3、培养基的制备 茎尖组织需在培养基上进行培养，由培养基提供生长所需营养。常用的培养基是MS培养基。含有大量元素N、P、K，中量元素Ca、Mg、S，微量元素Zn、Mn、B、Cu，还有维生素、腺嘌呤、蔗糖、琼脂等，pH5.7 ～ 5.8。根据需要，做成固体培养基或液体培养基（不加琼脂），装在试管或三角瓶中，高压灭菌后放在无菌室备用。 4、茎尖组织剥离和接种 选芽长至3～4厘米，还未充分展叶时，将芽剪下。先将外面几层叶片剥除，然后将其放入烧杯，用纱布封口，在自来水下冲洗半个小时，取出放到无菌室进行消毒。一般先在95％酒精中迅速沾一下，然后在5％漂白粉液中浸泡5～10分钟，再用无菌水冲洗4～5次。将消过毒的芽放在40倍解剖镜下，用消过毒的刀剥取带有1～2个叶原基的茎尖，长度约0．2毫米，接种到有培养基的试管中，每个试管一个茎尖。 还有一种方法是，把经过消毒的薯芽，直接插入培养基中，生根长成苗后，再做剥离，成活率高，效果好。 5、组织培养 将已接好的茎尖，放在培养室中培养试管苗。培养室的温度要保持在20～25℃，光照为2000～3000勒克斯，每天16小时以上光照。约经30～40天，茎尖可明显伸长，4个月左右发育成有根系和3～4片叶的小苗——茎尖苗。此时可将其在无菌条件下进行单节切段，并种于带有培养基的三角瓶中，继续培养，进行扩繁。25～30天再次长成“茎尖苗”，又可进行单节切段扩繁。 6、病毒检测 成苗后，每个芽的后代，取两瓶苗进行病毒检测。检测病毒的种类，一般是5～8种： PVX、 PVY、 PVA、 PLRV（卷叶病毒）、PVM、PVS、PSTVD(纺锤块状类病毒)、PMTV等。常用方法是：采用双抗体酶联免疫吸附法（DAS-ELISA），要找有资质的专业检测单位检测，价格较便宜的单位是：江苏省 江阴沃土农业生物科技开发有限公司，行内较认可。 检测无病毒的，脱毒成功，相应芽的后代加速扩繁；检测有病毒的，相应的材料全部淘汰。 7、脱毒苗快繁 当确认脱毒成功、无病毒后，还需鉴定其是否具有该品种的典型性状，以防止在剥离茎尖培养过程中发生无性变异。当确认试管苗符合品种特性并不带病毒后，即可继续扩繁试管苗——基础苗。将产生的基础苗分成两部分：其一，连续扩繁，以满足生产原原种和微型种薯需要；其二，低温保存，为下年生产扩繁施用。 基础苗使用两年左右应重新进行剥离，进行更新，以保持质量。 试管苗的扩繁需在无菌条件下，进行单节切段，平放在有培养基的三角瓶中，置于培养室内，保持23～25℃，约20～25天即可长成7～8片叶的小苗。单节切段每株苗可切7～8段，以此速度，一株试管苗从茎尖培养开始，一年可繁百万株试管苗。 （二）微型脱毒种薯原原种（微型薯）的生产 微型薯的生产：在温室或防虫网棚中进行。 当基础苗繁殖到一定数量时，先打开三角瓶封口，在温(网)室中进行炼苗，使其加粗，然后取出将根部培养基洗净，将从基础苗上剪下的茎段在生根液中浸泡5～10min，移栽到以蛭石或消毒草炭为基质的育苗盘中。苗期和结薯期分别喷洒促进扎根、长苗和结薯的营养液，人工调节控制光、温、水、肥、气等生长条件，扦插密度3×3㎝或4×3㎝，每㎡扦插830-1100株，脱毒苗在基质生长60天左右收获一茬，每㎡可收获1000-1500粒重1～10g的微型脱毒种薯。 由于防虫网的防护，加常喷杀虫剂和无土栽培，所以，既避免了病毒传播、侵染，也无细菌、真菌病害，——也叫顶级脱毒原原种。 除了无土栽培外，还有水培、雾培等方法生产。 （三）常规脱毒原原种生产技术 在气温相对较低的地方，建造防虫网室，土地进行精细整地，把经过室外温度锻炼的脱毒苗移栽到土壤中，每亩栽植6000株左右，缓苗后按正常肥、水