启动子序列克隆和功能方法的进展_杨晓娜解剖.pdf

25 　 2 　　 　　　　　　　　　　　 　 　　　　　　　 2010 　 3 　　　　　　　　　　 JournalofYunnanAgriculturalUniversity　　　　　 Vol.2 5　No.2 Mar. 2010 ＊ 杨晓娜 , 赵昶灵＊＊ , 李 　云 , 李会容 , 苏 　丽 , 周燕琼 ( , 650201) : 、 PCR 、 Y 。, , ,、 。 :; ; :Q 343.1　　 PCR 、 PCR 。 PCR 、 、 、、 PCR 、 。 ; 。 ; :A　　 :1004 -390X (2010) 02 -0283 -08 、 PCR ResearchAdvancesintheMethodsofCloningand Function-analyzingofPromoters YANGXiao-na, ZHAO Chang-ling, LIYun, LIHui-rong, SULi, ZHOUYan-qiong (CollegeofAgronomyandBiotechnology, YunnanAgriculturalUniversity, Kunming650201, China) Abstract:Inthispaper, theresearchadvancesinthemethodsofthecloningandfunction-analyzingof promoterswerereviewed.Themainmethodsusedforpromotercloningaregenomiclibrary-screening, probevector-screening, conventionalpolymerasechainreaction(PCR), inversePCR (I-PCR), panhandlePCR(P-PCR), sequencespecificprimersPCR(SSP-PCR), thermalasymmetricinterlacedPCR(TAIL-PCR), andY-shapedadaptordependentextension(YADE), ofwhichTAIL -PCRisthemosteffectiveone, becauseitiseasytooperateandwithhighspecificity.Approaches ofpromoterfunction-analysisincludebioinformaticalandexperimentalanalysis.Thebioinformaticalanalysisreliesondatabasesearchingtopredictpromotersequences.Theexperimentalanalysiscandeterminethecis-actingelementsandtheirfunctions.Theconcreteanalyticalstrategiesincludedpoint mutation, gelretardation, transientexpression, transformationandyeastone-hybridization.Thisreviewcanprovideareferenceforthefunction-researchingofpromoters. Keywords:promoter;sequence-cloning;function-analyzing;methods 　　 (promoter) (RNApolymerase, RNA Pol) DNA [ 1] 。 RNA 、 , [ 2] 。 、、 　 ＊ 　 ＊＊ :2009 -05 -31　　　 : 2009 -06-23 : (2006C0030Q); : (1984 -), , , Correspondingauthor: (1969 -), , 、、 , (A20 020 96)。 。 , ,, , 。 E-mail:zhaoplumblossom7@163.com 284 　　　　　　　　　　　　　　 25 , DNA (cis-actingelements) (trans-act- ingfactors) ,, 、 [ 3] 。 , (expressionvector); [ 4] 。 , , 、 。 , 。 2006 , [ 5] 、3 。 2008 , [ 6] 、 、 , 。 1　 1.1　 　　 , [ 7] , 、 。 , (genomiclibrary) : (abundance) (probe), , ,、 [ 6] ( 1)。 , ,、 [ 6] 。 19