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2017届 二轮 基因工程专题 1、(2016·高考全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了、和三种限制性内切酶的识别序列与切割位b)为某种表达载体的示意图(载体上的、的切点是唯一的)。 根据基因工程的有关知识回答下列问题：(1)经酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接理由是____________________________。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子如图(c)所示。这三种重组子中不能在宿主细胞中表达____________，不能表达的原因是________________________________________________________________________。 (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶常见的有____________和____________其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________。解析：(1)由图(a)可知尽管和两种限制酶的识别位点不相同但两种酶切割后产生的DNA片段具有相同的黏性末端故被酶切后得到的目的基因可以与图(b)中表达载体被酶切后的产物连接。(2)运载体上的启动子和终止子具有调控目的基因表达的作用由于甲和丙的目的基因分别插3)常见的DNA连接酶是连接酶和T连接酶但作用有所差别连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端而连接酶只能连接黏性末端。答案：(1)　两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙　甲中目的基因插入在启动子的上游丙中目的基因插入在终止子的下游二者的目的基因均不能被转录(3)E·coli DNA连接酶　T连接酶　T连接酶(2015·高考四川卷分)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中可获得抗棉铃虫的转基因棉其过程如下图所示(注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中)。 (1)过程①需用同种________________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过________培养基。(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养旨在让________进入棉花细胞；除尽农杆菌后还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养目的是________________________________________________________________________。(3)若过程④仅获得大量的根则应在培养基中增加________________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根原因是________________________________________________________________________。(4)检验转基因棉的抗虫性状常用方法是________。种植转基因抗虫棉能减少________的使用以减轻环境污染。解析：(1)切割目的基因和载体应使用同种限制性核酸内切酶筛选细菌应使用选择培养基。(2)农杆菌转化法的原理是农杆菌感染植物时质粒上的T-DNA片段能够转移并整合到植物细胞的染色体DNA上。因为T-DNA上具有卡那霉素抗性基因所以可用含卡那霉素的培养基筛选出获得T-DNA片段的植物细胞。(3)植物组织培养过程中可加入激素调节植物细胞的脱分化和再分化。生长素用量比细胞分裂素用量比值高时有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时有利于芽的分化、抑制根的形成。幼嫩的芽顶端可以产生生长素并向基部运输促4)在个体水平上检测抗虫棉时可在抗虫棉上投放害虫来判断其是否具有抗虫的性状；抗虫棉因具有抗虫性状故可减少农药的使用以减轻环境污染。答案：(1)限制性核酸内切　选择　(2)T-DNA　筛选获得T-DNA片段的植物细胞　(3)细胞分裂素浓度　芽顶端合成的生长素向基部运输促进根的分化　(4)投放棉铃虫　农药(2016·押题密卷)如图所示为培育两种新品种草莓的流程示意图请回答下列相关问题： (1)获取人胰岛素基因的方法有________________________________________________________________________________________________。将胰岛素基因导入草莓细胞之前需构建基因表达载体该过程所用到的酶有________________。完整的重组质粒除胰岛素基因外还必须有启动子、________以及标记基因等特殊的片段。(2)图中过程①人工诱导细胞融合的物理法有________________。与诱导动物细胞融合的方法相比过程①不能使用的方法是________________。(3)要从分子水平上检测目的基因(胰岛素基因)导入受体细胞后是否成功表达可采用的方法是______________。(4)通过过