利用Lightcanner进行高分辨率溶解曲线分析时一种转板器的制作及其使用.doc

利用Lightcanner进行高分辨率溶解曲线分析时一种转板器的制作及其使用方法 声明：，本方法由Along独立创制，如有雷同纯属巧合 导言 出于节省试验成本需要对lightscanner匹配的全裙边PCR板进行反复利用时或者实验室缺乏匹配全裙边PCR板PCR仪的情况下，需要在PCR扩增完后把普通PCR板（或8/12连管）PCR产物转移到全裙边板子上，如果用排枪（或单枪）吸取，如果是大规模筛选，个人觉得比较麻烦，而且会存在少量残留，如何快速高效转移呢？笔者找到了一个比较简便的方法，下面进行简单介绍。 配套材料要求 普通PCR板：管口要凸出，与板子齐平的不行。 匹配Lightscanner的全裙边板： /zh-cn/sku/hsp9665-hard-shell-low-profile-thin-wall-96-well-skirted-pcr-plates 转板器制作及使用 96孔微孔板的选择（微孔板也叫细胞培养板、酶标板等） 选择特定类型的V底（U底也可接受）96孔微孔板（不是每种品牌都可以使用，不同品牌间在构造上略存差异，这些差异有可能导致不能改造成转板器），材料最好是PP(聚丙烯，就是普通PCR管的那种材质)，因为其比较柔软一些，易于打孔而不破裂（市面上的微孔板多是PS即聚苯乙烯材料的，本人没有试过，因其比较脆，恐不好打孔）。本人验证Eppendorf的V底（U底也可接受）96孔微孔板（Eppendorf货号0030 601.300）与全裙边板非常匹配，只要微修打孔即可使用，下面就以此种微孔板为例介绍制作转板器的方法。 工具 制作方法 1、修支脚（目的是使管底直接搭在全裙边板上，而不是悬空） 2、打孔（烫孔） 用夹钳夹住尖底螺丝钉（越尖越好）在酒精灯上烧热后，从微孔板底部，对准管底中央尖端烫开一小孔，一次烧热可以烫三四个孔，所有孔烫完后用手抠掉那些粗糙的塑料结痂（不需要抠得多彻底）。下图是修支脚及打孔之后的效果 3、检验效果 有可能由于孔不平滑使离心后液体有少部分残留，因此必须检查是否存在液体残留现象，按下面的使用方法，用少量纯水试验。试验没问题就可以用样品正式进行。 使用方法 把PCR版扣在微孔板孔里，然后把微孔板搭在全裙边板上离心即可，若担心离心时滑落（一般不会）则捆个橡皮筋即可。2000rpm，30s，ok！ 这种管口的可以 这种管口的不行 用小刀把图示部位的所有支撑横挡支脚全部去除，修到突出的平面齐平即可，不需要修到底部