- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
选修一背默知识点
一、 大肠杆菌的培养和分离
1.大肠杆菌的扩大培养
用LB液体培养液扩大培养,再用LB固体培基分离,形成一个个单独的菌落。
LB液体培养基是细菌通用培养液;MS培养基是植物组织培养通用培养基
2.细菌分离方法比较
划线分离法---方法简单;
涂布分离法—单菌落易分离,操作复杂
3.灭菌操作
① 灭菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的
② 各种培养基必须是无菌
4.培养和分离步骤
培养基灭菌→倒平板→培养液培养→划线分离→培养保存
5.灭菌与消毒
灭菌
消毒
常用方法
高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、紫外灯
酒精、氯气、煮沸消毒
条件
使用强烈的理化因素
使用较温和的理化方法
结果
杀死物体内外所有的微生物
杀死物体表面或内部部分微生物
适用范围
培养皿、培养基、接种环、玻璃刮刀
外植体、操作空间、实验者的手等
二、 分离以尿素为唯一氮源的微生物
1.实验原理
(1)利用尿素的细菌含有脲酶,通过降解尿素作为其生长的氮源,其反应式如下:
(NH2)2C=O+H2O----脲酶→2NH3+CO2
(2)利用指示剂(酚红)颜色变化检验脲酶所催化的反应,若酚红由红黄色变为红色,证明尿素以被脲酶水解产生NH3
2实验步骤
制备LB全素培养基和以尿素为唯一氮源固体培养基→制备细菌土壤悬液,并稀释至10-3、10-4、10-5、10-6→涂布法分离→培养保存
注意:在恒温箱中培养时,培养皿要倒置—防止凝结的蒸馏水滴到培养基上
3预测结果:
① LB全素固体培养基上菌落多而杂;
② 以尿素为唯一氮源固体培养基菌落少而纯;
③ 一定时间内,菌落周围出现红色区域;
④用浓度为10-4和10-5土壤稀释液接种,10-5土壤稀释液更容易形成单菌落。
三、 果汁中的果胶和果胶酶
1.果胶是植物细胞壁的主要成分之一,由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲脂组成。果胶主要作用是将细胞粘合在一起,去掉果胶,植物组织会变松散。
2.果胶不溶于乙醇,这是鉴别果胶的一种简易方法。
3.果胶酶和果胶甲脂酶可水解果胶,与制取果汁有关。
4.黑曲霉、苹果青霉等微生物可用于生产果胶。果胶酶将果胶分解成可溶性分子,是浑浊的果汁变沉请,是出汁率提高。
5.实验步骤:
第一步
制作山楂匀浆
第二步
A烧杯+5g匀浆+10ml黑曲霉提取液
B烧杯+5g匀浆+10ml无菌水
间歇搅拌20-30min
第三步
试管1
试管2
试管3
试管4
4mlA烧杯混合液
4mlA烧杯混合液
4mlB烧杯混合液
4mlB烧杯混合液
沸水浴
不加热
沸水浴
不加热
上清夜
上清夜
上清夜
上清夜
现象
最澄清
澄清
较浑浊
浑浊
第四步
加入4ml95%乙醇
现象
沉淀物最少
沉淀物较少
沉淀物较多
沉淀物最多
四、a-淀粉酶的固化及淀粉水解作用的检测
1.固定化酶:①形成:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之为不溶于水而又有酶活性的制剂;②固化方法:吸附法、吸附法、交联法、包埋法、共价偶连法等
固定化酶方法
a-淀粉酶固化
2. a-淀粉酶水解作用的检测
①a-淀粉酶水解作用的检测原理:
将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液流经固定化酶柱,可使水解成糊精。用淀粉指示剂KI-I2液测试,流出物呈红色,表明水解产物有糊精生成。
淀粉-----a-淀粉酶---→糊精-----?-淀粉酶---→麦芽糖-----a-淀粉酶---→葡萄糖
遇I2显蓝色 遇I2显红色 遇I2不显蓝色
③ 将使用过的固定化酶柱用蒸馏水洗涤干净,放置在4度冰箱中保存,可重复使用。
五、果酒及果醋的制作
1.实验原料:葡萄或其他果汁
2.实验原理
①果酒:葡萄糖酒是酵母菌利用葡萄糖进行酒精发酵的产物。酵母菌只有在无氧条件才能进行酒精发酵,即将葡萄糖氧化成酒精,而且当培养液中酒精浓度超过16%时,酵母菌就会死亡。
酒精发酵反应式:C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+少量能量。
用葡萄制作的葡萄酒不含糖,酒精含量也低。
用果汁制作的果酒含糖量高,酒精含量也较高。
②果醋:醋化醋杆菌在有氧条件下才能将酒精氧化为醋酸,醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%。醋酸发酵反应式:C2H5OH +O2→CH3COOH+H5O+少量能量
果酒制作
果醋制作
装置图
呼吸方式
无氧呼吸
有氧呼吸
菌种
酵母菌
醋化醋杆菌
用瓶简易制作时
要加盖,定时拧松
不加盖,瓶口盖纱布
六、泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定
1.菌种:作用泡菜的腌制起主要的是假丝酵母和乳酸菌。
2.实验原理:在无氧条件下,微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵,乳酸菌将糖类转化为乳酸,这时需氧菌被杀死;当有机酸增加到一定程度时乳酸菌被杀死,出现酵母和霉菌,并逐渐产生亚硝酸。加白酒的作用是抑制杂菌生长,也是一种调味
文档评论(0)