枸杞多糖的抗氧化活性解读.ppt

枸杞多糖的抗氧化活性 营养15研 徐艳 枸杞子为茄科植物枸杞（Lycium barbarum L.）的成熟果实，其性味甘平，归肝、肾经，具有滋肝补肾、益精明目的功效。 枸杞多糖LBP ★主要活性成分 ★制备过程 ★抗氧化活性测定 ★细胞实验 ★小鼠实验 主要成分 类胡萝卜素，丰富的枸杞色素； 甜菜碱，在生物体内起甲基供应体的作用，能促进脂质代谢，具有抗脂肪肝的作用； 枸杞多糖，是一种非特异性的免疫增强剂，能提高机体免疫功能，增强抗病能力。 枸杞多糖的制备 枸杞预处理：60℃恒温干燥24h，称量，剪碎，回流脱脂，回流两次，每次3h，弃去剂，残渣风干，残渣即为经过预处理的枸杞。 枸杞多糖的提取：浸泡提多糖；超声波提取多糖；微波提取枸杞多糖 三氯乙酸法去除蛋白质 多糖沉淀：4倍体积 95% 乙醇沉淀，静置24h，离心(3000r/min， 30min)，弃去上清夜，固态物用95%乙醇，无水乙醇，丙酮，乙醚依次进行洗涤，于 60℃恒温干燥24h，即为枸杞多糖粗品。 多糖再沉淀 测定枸杞多糖的抗氧化活性 对DPPH自由基清除能力的测定 对超氧阴离子自由基清除能力的测定 细胞实验 MCR-5在细胞对数生长期进行实验 →氧化损伤实验分组： 实验分为空白对照组和低、中、高剂量BeSO4 毒组（分别为1、10、100μmol/L）。 每组６个平行样本，置于37℃、5％CO2 饱和湿度恒温培养箱中分别培养24h。 细胞实验 →LBP保护作用实验分组： 实验分为对照组、BeSO4 染毒组、 LBP组和 BeSO4 ＋ LBP组。 BeSO4染毒组选择10μmol/L，LBP选择0.2mg/ml，每组６个平行样本，置于37℃、5％ CO2 饱和湿度恒温培养箱分别培养24h。 小鼠实验1 取小鼠30只，随机分为3组，枸杞多糖大、小剂量组分别灌胃100mg·kg-1·d-1，50mg·kg-1·d-1的枸杞多糖；对照组灌胃等量的生理盐水, 连续 7d 。 在给药后的第 8 天，对小鼠进行游泳实验，水温 ( 43 ±2)℃，水深50cm，给小鼠尾根部负重，记录小鼠力竭游泳时间。 小鼠实验2 小白鼠 40 只，随机分为4组，枸杞多糖大、小剂量组分别灌胃枸杞多糖100mg·kg-1·d-1，50mg·kg-1·d-1 ，对照组又分为运动组和非运动组，均灌胃等剂量的生理盐水，连续 21d 。 在给药的第7、14和21天，对小鼠进行3次游泳训练，水温(32 ±2)℃，水深 50 ㎝，每次 20 min。 第22天小白鼠尾根部负重游泳，记录从开始游泳至力竭所持续的时间, 力竭后将小鼠取出水面，采用眼球摘除取血，分离血清，40℃保存备用，分别测试血中的SOD和MDA含量。 结论 枸杞多糖可以显著提高运动细胞和小鼠体内SOD的活力、明显降低MDA的含量， 能显著延长小鼠游泳时间，说明其有清除自由基，保护细胞，延缓衰老的作用。 谢谢 * *