2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体(mmr).ppt

* 2.2.2 动物细胞融合和单克隆抗体 2.2 动物细胞工程 1、定义：指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。 一、动物细胞融合 （也称细胞杂交） 3.原理： 两个细胞正在融合 受精作用 细胞膜的流动性 2.结果： 形成具有原来两个或多个细胞遗传信息单核的杂交细胞 1、动物细胞融合的诱导因素包括哪些？ 2、动物细胞融合的意义 ？ 3、动物细胞融合与植物体细胞杂交有什么不同？ 一、 动物细胞融合 4.诱导方式： 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 一、 动物细胞融合 5.意义： 　突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 6. 应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 主要用途： 制备单克隆抗体 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合 原理 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 细胞融合 的过程 酶解法去除细胞壁后诱导原生质体融合 胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合 诱导 方法 物理：离心、振荡、电激。 化学：聚乙二醇 物理、化学方法（同左） 生物：灭活的病毒 结果 获得杂种植株 获得杂交细胞，以生产细胞产品。 用途 培育新品种 主要用于制备单克隆抗体 例1．下列关于动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，叙述正确的是(　　) A．诱导融合的方法完全相同 B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同 D．都能形成杂种细胞 D 二、单克隆抗体 1.什么是抗体？ 2.抗体是由何种细胞产生的，如何产生？ 抗体是指能与抗原发生特异性免疫反应的蛋白质。 浆细胞（效应B细胞） 要受到抗原刺激 3.传统的抗体生产方法及缺陷是什么？如何解决？ 每种免疫的B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。 抗体的传统生产方法 从血清中分离抗体 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 多种效应B细胞 动物体内 多种抗体 抗原 怎样获得产量高、单一类型的抗体？ 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆 抗体 要获得既能产生特异性抗体，又能大量繁殖的细胞 单克隆抗体的制备 —极富创造性的方案 米尔斯坦和科勒的设想与行动 （见书P54) 米尔斯坦 柯勒 　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 单克隆抗体 特异性强、灵敏度高，可大量制备 特点： 米尔斯坦和科勒因此在1984年获诺贝尔奖。 单克隆抗体的制备过程 阅读教材，回答下列问题： 1、怎样获得能产生特异性抗体的B细胞？ 2、杂交瘤细胞具有什么特点？ 3、为何要进行多次筛选？ 4、大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法？ 5、该过程中运用了哪些动物细胞工程技术？ 单克隆抗体制备过程： 筛选 杂交细胞 培养、 专一抗体检测、筛选 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 选择培养基 灭活的病毒等手段 杂交瘤细胞 注射抗原 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 体外培养 注射到小鼠腹腔 提取单克隆抗体 单克隆抗体制备小结 1、两种细胞的获得： 骨髓瘤细胞： B淋巴细胞： 2、杂交细胞具有的特点： 3、单克隆制备过程有两次筛选目的： 4、单克隆抗体优点： 从患骨髓瘤的小鼠体内获得 注射特定的抗原蛋白所获得的相应B淋巴细胞，是已免疫的B淋巴细胞 无限增殖，产生特异性抗体 第一次筛选出杂交瘤细胞 第二次筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高、可大量制备 单克隆抗体的应用 主要有： 1、临床诊断 2、治疗疾病和运载药物 　　单克隆抗体纯度高、特异性强，所以能准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定的抗原发生特异性结合。因此，单克隆抗体在怎短的应用上，具有准确、高效、简易和快速的优点。 主要用于癌症治疗 作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 单克隆抗体+抗癌药物 *