2016-2017届高中生物第4章生物化学与分子生物学技术实践第1节生物成分的分离与测定技术学案苏教版选修1.docVIP

第一节　生物成分的分离与测定技术 1．掌握分离与测定生物成分中蛋白质的技术。(难点) 2．掌握采用醋酸纤维薄膜电泳的方法分离并纯化蛋白质。(重点) 3．掌握采用水蒸气蒸馏法和脂溶性有机溶剂提取法提取脂肪成分。(重难点) 分 离 与 测 定 生 物 成 分 中 的 蛋 白 质 1．抽提液的选择2．分离蛋白质的方法 (1)离心沉降法：通过控制离心速率，使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层。 (2)薄膜透析法：利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，使蛋白质与小分子化合物分离开的纯化蛋白质的方法。 (3)凝胶色谱法： ①概念：根据蛋白质分子的大小对其进行有效分离的方法。 ②凝胶 ③原理 是否进 入凝胶 颗粒 移动途径 路程 移动 速度 洗脱 次序 大分子 蛋白质 不能 进入 凝胶颗粒 间隙 较短 较快 先洗 脱出来 小分子 蛋白质 可以 进入 凝胶颗 粒内部 较长 较慢 后洗 脱出来 (4)电泳法：将所带电荷的数量和性质不同的蛋白质从混合样品中分离并纯化出来。 3．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 配制试剂―→准备器材―→架滤纸桥―→浸泡薄膜―→细心点样―→平悬薄膜―→实施电泳―→染色―→漂洗―→脱色 [合作探讨] 探讨1：在抽提液中加入蛋白酶抑制剂的目的是什么？ 提示：防止提取过程中蛋白质被蛋白酶分解。 探讨2：在电泳过程中，影响泳动速度的因素有哪些？ 提示：带电颗粒