1.氨基酸与多肽的化学案例.ppt

* 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 多肽的液相合成 (1)氨基酸的基团保护 (2)接肽缩合反应 (3)除去保护集团 循环反应 * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 多肽的固相合成 常用固相载体： 聚苯乙烯树脂 羧基与载体相连. 合成方向：C端到N端 2.成肽键 * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University (四）侧链R基参加的呈色反应 * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 反应名称 试剂组成 对应氨基酸 最终颜色 Millon（米伦）反应 硝酸汞，亚硝酸汞和硝酸 Tyr 红色 Folin（福林）反应9 磷钼酸好磷钨酸 Tyr或Trp 蓝色 Sakoguchi (坂口)反应 碱性次溴酸钠和α-萘酚 Arg 红色 Pally（） 对氨基苯磺酸盐酸溶液，亚硝酸钠和碳酸钠 His和Tyr 红色和橘黄色 Glyoxalate（乙醛酸）反应 乙醛酸和浓硫酸 Trp 紫色 半胱氨酸反应 亚硝酸-铁氰化钾的甲醇溶液 Cys 红色 四、氨基酸相关的其他重要概念 必需氨基酸(essential amino acid,EAA)： 人体体内自身不能合成,必须从食物中获得 成人有8种必需氨基酸： 甲硫氨酸(Met)、缬氨酸(Val)、赖氨酸(Lys)、 异亮氨酸(Ile)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Try)、 亮氨酸(Leu)、 苏氨酸(Thr) 婴儿时期所需:精氨酸(Arg)、组氨酸(His) * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 食物蛋白质的互补作用:营养价值较低的食物蛋白质合理搭配、混合食用,从而互补必需氨基酸的不足,提高营养价值. * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 2.紫外吸收 Trp、Tyr和 Phe在280nm附近有一定的吸收.原因：分 子中含有苯环(共轭双键). 据此可以通过测定蛋白质溶液280nm的吸光值测定蛋白质含量 * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 四 氨基酸的分离、分析与生产 （一）氨基酸的分离 1、溶解度法：温度或pH 2、特殊沉淀剂法：有机或无机物与aa形成不溶性衍生物,如Asp制成铜盐沉淀 3、离子交换法：离子交换树脂 4、电渗析法：离子交换膜（阴离子、阳离子），外加电场 * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University （二）氨基酸的分析 1.纸色谱法paper chromatography ：滤纸纤维 Rf值 水合茚三酮显色 展层剂（正丁醇︰80%甲酸︰水=15︰3︰2） * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 双向纸层析图 2.薄层色谱法（thin layer chromatography） 用于氨基酸的定性鉴别 * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 吲哚醌的无水乙醇冰醋酸溶液显色 3.高效液相色谱(high performance liguid chromatography，HPLC)：定性定量 4.离子交换层析（ion exchange chromatography）：定量 5.自动氨基酸分析仪 6.质谱(MS) * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University （三）氨基酸的生产 1.水解法（hydrolization） 酸水解：6-10M的盐酸,110-120℃,12-24h 优点：水解彻底，氨基酸不消旋 缺点：Trp被完全破坏，Asn、Gln去氨化 碱水解：4-6M NaOH， 100-110℃,6-24h 优点：水解完全，Trp不被破坏 缺点：氨基酸易消旋，Ser、Thr、Arg等大部分被破坏 酶水解：蛋白酶 优点：反应条件温和，氨基酸不被破坏，不消旋 缺点：水解不彻底 * 烟台大学药学院 School Pharmacy of Yantai University 2.微生物发酵法 3.化学合成法：产物为消旋体，需进行拆分 4.酶合成法：化学合成法配置基质，利用酶促反应 如：L-天冬氨酸脱羧酶催化： L-Asp