2017届高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件新人教版选修1.pptVIP

一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述,其中错误的是(　　) A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48 h D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 解析：为保证结果准确可靠,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 答案：D 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 统计菌落数目的方法 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 二、“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验过程 土壤取样:从肥沃、湿润的土壤中,用无菌小铁铲铲去表层土,迅速取土壤并装入无菌信封密封 制备培养基:准备选择培养基,以尿素为唯一氮源制备9个平板培养基 样品的稀释:在火焰旁称取土壤10 g,放入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,振荡使土样与水充分混合,将菌分散。制成101倍土壤稀释液,用一支1 mL无菌吸管从中吸取1 mL土壤悬液注入盛有9 mL无菌水试管中,吹吸三次,使充分混匀,制成102倍土壤稀释液,以此类推制成103、104、105、106倍土壤稀释液 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 取样涂布:在上述培养基的9个平板底面,每三个一组分别用记号笔写上104、105、106倍的三种稀释度,然后用三支1 mL无菌吸管分别从104、105、106倍的三管土壤稀释液中吸取0.1 mL对号放入已写好稀释度的平板中,用无菌涂布器在培养基表面轻轻地涂布均匀(如图) 样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 培养观察:将培养基平板倒置于30~37 ℃温室中培养1~2 d,每隔24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果 菌落计数:常用稀释涂布平板法,设计如下表格记录并计数 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 易错突破 合作探究 自主预习 目标导航 预习导引 目标导航 预习导引 一 二 三 一、细菌分离与计数的研究思路 1.自然界中目的菌株的筛选 (1)依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。 (2)实例:PCR技术中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中分离到的。? 2.实验室中目的菌株的筛选 (1)理论依据 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 (2)选择培养基 在微生物学中,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 目标导航 预习导引 一 二 三 3.统计菌落数目 (1)常用方法:活菌计数法。 ①统计依据 a.当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。 b.通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 ②注意事项:为保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 ③计算方法 每克样品中的菌株数=(C÷V)×M ,其中C代表某一稀释度下平板上的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。 (2)其他方法:利用显微镜直接计数。 目标导航 预习导引 一 二 三 4.设置对照 目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 目标导航 预习导引 一 二 三 二、实验设计 1.实验设计的内容 实验设计包括对实验方案,所需仪器、材料、用具和药品,具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。 2.土壤中的微生物 土壤中的微生物主要分布在距地表约3~8 cm的近中性土壤中,约70%~90%为细菌。? 3.样品的稀释 因为不同微生物在土壤中含量不同,为保证获得菌落数在30~300之间,适于计数的平板:细菌稀释倍数为104、105、106,放线菌稀释倍数为103、104、105,真菌稀释倍数为102、103、104。 目标导航 预习导引 一 二 三 4.微生物的培养 不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。 细菌一般在30~37 ℃的温度下培养1~2 d,放线菌一般在25~28 ℃的温度下培养5~7 d,霉菌一般在25~28 ℃的温度下培养3~4 d。在菌落计数时,每隔24 h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。? 5.菌落的特征 菌落的特征包括菌落的形状、大小、隆起程度