基因工程课件附加对应习题概要.ppt

二、基因工程中常用的载体——质粒 1.特点:质粒是一种裸露的、小型、双链、环状DNA分子。 2.本质:质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型DNA分子,不是细胞器。 3.质粒作为载体所具备的条件: (1)能自我复制:能够在受体细胞中进行自我复制,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA进行同步复制。 (2)有切割位点:有一个至多个限制酶切割位点,供外源基因插入。 (3)具有标记基因:具有特殊的标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 (4)无毒害作用:对受体细胞无毒害作用,否则受体细胞将受到损伤甚至死亡。 4.作用: (1)作为运输工具,将目的基因导入受体细胞。 (2)质粒携带目的基因在受体细胞内大量复制。 【微点拨】 (1)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同,前者的实质是DNA分子,能将目的基因导入受体细胞,后者是蛋白质,与细胞膜的选择透过性有关。 (2)一般来说,天然载体不能同时满足上述条件,要对其进行人工改造才可以使用。 专题1　基因工程 1.1　DNA重组技术的基本工具 一、基础理论和技术的发展催生了基因工程 1.基因工程概念: (1)操作环境:生物体外。 (2)操作对象:基因。 (3)操作水平:________水平。 (4)主要技术:________和_______等技术。 (5)操作结果:赋予生物新的_________,创造出更符合人们需要的 新的_________和生物产品。 (6)操作原理:_________。 DNA分子 DNA重组 转基因 遗传特性 生物类型 基因重组 2.基因工程的基础理论和技术支持(连线): 二、基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶(也称“限制酶”)——“分子手术刀”: (1)来源:主要来自_________。 (2)种类:约______种。 (3)特点:具有专一性。 ①识别双链DNA分子的某种_______________。 ②切割特定核苷酸序列中的特定位点。 (4)作用:断开两个核苷酸之间的___________。 (5)结果:产生_________或_______。 原核生物 4 000 特定核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 2.DNA连接酶——“分子缝合针”: (1)作用:将____________“缝合”起来,恢复被_______切开的两 个核苷酸之间的___________。 双链DNA片段 限制酶 磷酸二酯键 (2)种类: 既可以“缝合”双链DNA片段互补的 _________,又可以“缝合”双链DNA 片段的_______ T4噬菌体 T4DNA 连接酶 只能“缝合”具有_____________的 双链DNA片段 _________ ________ DNA连接酶 特　点 来　源 种　类 E·coli 大肠杆菌 互补黏性末端 黏性末端 平末端 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”: (1)种类。 ①质粒:常存在于_________和_______中,是一种分子质量较小的、 环状的、裸露的DNA分子,独立于拟核之外。 ②λ噬菌体的衍生物和___________等。 (2)目的。 ①将目的基因_____到宿主细胞中去。 ②在受体细胞内对目的基因进行大量_____。 原核细胞 酵母菌 动植物病毒 转运 复制 (3)必备条件。 ①在宿主细胞中保存下来并大量_____。 ②有多个_______________。 ③有一定的_________,便于筛选。 ④对_________无害。 复制 限制酶切割位点 标记基因 受体细胞 三、重组DNA分子的模拟操作 1.材料用具:剪刀代表_______,透明胶条代表__________。 2.切割位点: (1)分别从两块硬纸板上的一条DNA链上找出____________序列,并 选____之间作切口进行“切割”。 (2)再从另一条链上___________之间寻找EcoRⅠ相应的切口剪开。 3.操作结果:若操作正确,不同颜色的黏性末端应能_________;否则,说明操作有误。 EcoRⅠ DNA连接酶 G-A-A-T-T-C G-A 互补的碱基 互补配对 【易错辨析】 1.基因工程的原理是基因重组,不过在这里这种变异是定向的。( ) 2.DNA重组技术所需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体。( ) 【分析】注意是“工具酶”,载体不是酶。 3.DNA聚合酶也可以用作DNA重组技术的工具。　( ) 【分析】DNA聚合酶的作用是将单个的脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上,即一个一个地往上“聚”;而DNA连接酶连接的是DNA片段,即一片一片地“连”。 √ × × 4.限制酶在原来的原核细胞内对细胞自身有害。　( ) 【分析】限制酶切割外源DNA,而使之失效,达到保护自身细胞的目的。 5.限制酶和DNA连接酶的