4-中药制剂_含量测定试卷.ppt

高效液相色谱法（HPLC） 三、化学键合相色谱法（分配+吸附） 反相离子对色谱 反相色谱中，在极性流动相中加入离子对试剂，使被测组分与其中的反离子形成中性离子对，增加k和tR，以改善分离 反相离子抑制色谱。 在反相色谱中，通过加入缓冲溶液调节流动相pH值，抑制组分解离，增加其k和tR，以达到改善分离的目的。 高效液相色谱法（HPLC） 实验条件的选择 检测器 UV或UVD：被测物有紫外吸收，流动相的截止波长小于检测波长。 FD：灵敏度高，荧光物质检测。 ELSD：挥发性低于流动相的组分，糖类等大分子。 ECD、RID、CLD等 高效液相色谱法（HPLC） 实验条件的选择 定量分析方法 一、外标法（同GC） 二、内加法 将待测物的纯品加入待测样品溶液中，通过测定该纯品加入前后组分峰高或峰面积的变化进行含量测定的方法。 高效液相色谱法（HPLC） 实验条件的选择 定量分析方法 一、外标法（同GC） 高效液相色谱法（HPLC） 实验条件的选择 定量分析方法 二、内加法 荧光分析法法 本身具有荧光或能转化为荧光的物质，如胺类、甾体、蛋白质、氨基酸和酶等 原子吸收分光光度法 呈源自状态的金属和部分非金属。中药材中重金属、毒害元素、微量元素等 * * ①过量的试剂若干扰被测组分的测定，则应设法除去；②大量杂质以沉淀形式除去时，被测成分应不因产生共沉淀而损失；③被测组分生成沉淀时，其沉淀经分离后可重新溶解或直接用重量法测定 气相色谱法（GC） 定量分析方法 峰面积的测量 正常峰 不对称峰 自动求和（自动积分仪或色谱工作站）：直接给出A，h，W1/2 气相色谱法（GC） 定量分析方法 定量校正因子 气相色谱法（GC） 定量分析方法 定量校正因子 绝对校正因子 气相色谱法（GC） 定量分析方法 定量校正因子 相对校正因子 气相色谱法（GC） 定量分析方法 常用的定量分析方法 归一化法 外标法 校正因子内标法 标准溶液加入法 气相色谱法（GC） 定量分析方法 常用的定量分析方法 归一化法 前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰 依据：组分含量与峰面积成正比 气相色谱法（GC） 定量分析方法 常用的定量分析方法 外标法 以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法 a 工作曲线法 b 外标一点法 c 外标两点法 气相色谱法（GC） 定量分析方法 常用的定量分析方法 外标法 b 外标一点法 一种浓度对照物对比样品中待测组分含量 前提：截距为0，对照品浓度与待测组分浓度接近 外标法特点： 1）不需要校正因子，不需要所有组分出峰 2）结果受进样量、进样重复性和操作条件影响大→每次进样量应一致，否则产生误差 气相色谱法（GC） 实例 麝香祛痛搽剂中樟脑的含量测定 色谱条件与系统适用性试验 以聚乙二醇(PEG200为固定相，涂布浓度为10％；柱温为程序升温80～160℃；初温保持4min后，每分钟升高4℃，终温保持16min。理论塔板数按樟脑峰计算应不低于13 000。 气相色谱法（GC） 1．对照品溶液的制备 精密称取樟脑对照品适量，加稀乙醇制成每1ml含1mg的溶液，即得。 2．供试品溶液的制备 精密量取本品2ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，即得。 3．测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入气相色谱仪，测得对照品峰面积为1200，供试品峰面积为1600。试计算本品中樟脑的含量。 气相色谱法（GC） 定量分析方法 常用的定量分析方法 校正因子内标法 校正因子的计算 取内标物和待测组分的对照液进样测定A 取含有内标物的供试品溶液进样测定A 气相色谱法 川贝枇杷糖浆中薄荷脑的含量测定 [含量测定] 照气相色谱（附录VI E）测定。 色谱条件与系统适用性试验 改良聚乙二醇毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.25um），柱温110℃；进样口温度为250℃；检测器温度为250℃；分流比为25:1。理论板数按萘峰计算应不低于5000。 气相色谱法 校正因子测定 精密称取萘适量，加环已烷制成每1ml含15mg的溶液，作为内标溶液。另取薄荷脑对照品75mg，精密称定，置5ml量瓶