2014细胞学作业技巧.doc

第二章细胞的统一性与多样性 问答题： 细胞有哪些基本共性？ 答：1.相似的化学组成 脂—蛋白体系的生物膜 相同的遗传装置 一分为二的分裂方式 2、试比较原核细胞与真核细有哪些不同的基本特征？ 答： 1.真核细胞有核膜，原核细胞无核膜；2.真核细胞有两个以上的染色体，染色体由线状DNA与蛋白质组成,原核细胞的染色体由一个（少数多个）环状DNA分子构成的单个染色体,DNA很少或不与蛋白质结合；3.真核细胞有核仁，原核细胞无核仁；4.真核细胞核糖体沉降系数为80S，原核细胞为70S；5.真核细胞有膜质细胞器，原核无；6.细菌具有裸露的质粒DNA，真核的有线粒体DNA，叶绿体DNA；7.真核细胞的动物细胞无细胞壁，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶。原核细胞的细胞壁主要成分是氨基糖和壁酸；8.真核细胞有细胞骨架，原核无；9.真核细胞的增殖方式以有丝分裂为主，原核细胞无丝分裂 试比较植物细胞与动物细胞的不同。 答：1.植物细胞有细胞壁、液泡、叶绿体以及其他质体；2动物细胞有中心体，植物细胞中不常见；3.植物细胞在有丝分裂后有一个体积增大与成熟的过程，动物细胞不明显； 第三章细胞生物学研究方法 一、名词解释 分辨率 ：能区分开两个质点间的最小距离 原位杂交： 用标记的核酸探针通过分子杂交确定特异核苷酸序列在染色体上或细胞中的位置的方法 差速离心：利用不同的离心速度所产生的不同离心力，将各种质量和密度不同的亚细胞组分和各种颗粒分开 放射自显影：利用放射性同位素的电离射线对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位以及半定量研究的一种细胞化学技术 二、问答题 1、各类光学显微镜用于观察显微结构时各有何特点（用途）？ 答:1.普通复式光学显微镜：最大分辨率为0.2μm，可以直接用于观察单细胞生物或体外培养细胞 相差显微镜：可以观察未经染色的标本和活细胞显微结构的细节 微分干涉显微镜：不仅可以观察未经染色的标本和活细胞显微结构的细节，还能显示结构的三维立体投影影像。 荧光显微镜：在光镜水平上，对细胞内特异的蛋白质、核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性定位研究。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 激光扫描共焦显微镜：可以改变焦点获得一系列不同切面上的细胞图像，经叠加后重构出样品的三维结构。可用于观察细胞形态，也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量。 电镜制样技术主要有哪些？各有何适用性？ 答：1.超薄切片技术：用于透射镜下观察样品内部的超微结构，还可以与放射性同位素自显影、细胞化学和原位杂交等技术结合，在超微结构水平上完成蛋白质与核酸等组分的定性、定位和半定量的研究。 负染色技术：能显示经纯化的细胞组分或结构，如线粒体基粒，核糖体甚至病毒的精细结构 冷冻蚀刻技术:主要用于观察膜断裂面上的蛋白质颗粒和膜表面形貌特征 电镜三维重构：适用于分析难以形成三维晶体的膜蛋白以及病毒和蛋白质-核酸复合物等大的复合体的三维结构 低温电镜技术：在电镜三维重构技术基础上发展得到，但更真实展示出生物大分子及其复合物表面与内部的空间结构，具有更高的分辨率 扫描电镜技术：能够得到样品表面的立体图像信息 有哪些实验技术可分别对细胞内特异性生物大分子（蛋白质、核酸）进行定位、定性、定量？ 答：1.蛋白质的定位定性：免疫荧光技术、显微电镜技术； 2.核酸定位与定性：原位杂交； 3.蛋白质、核酸定量：流式细胞术、显微分光光度测定技术；4.核酸、蛋白质等生物大分子定性、定位和半定量：放射性同位素自显影。 研究细胞内生物大分子之间的相互作用与动态变化涉及哪些实验技术？ 答:1.荧光漂白恢复技术：使用亲脂性或亲水性的荧光分子，如荧光素等与蛋白质或脂质偶联，用于检测所标记分子在活体细胞表面或细胞内部的运动及其迁移速率； 2.单分子技术：实时观测细胞内单一生物分子运动规律，能够在纳米空间尺度和毫秒时间尺度上精确测量单分子的距离、位置、指向、分布、结构以及各种动态过程；3.酵母双杂交技术 ：利用单细胞真核生物酵母在体内分析蛋白质-蛋白质相互作用；4.荧光共振能量转移技术：检测活细胞内两种蛋白质分子是否直接相互作用； 5.反射自显影技术：利用放射性同位素的电离射线对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位以及半定量研究的一种细胞化学技术 第四章细胞质膜 问答题： 膜脂有哪些基本类型？有哪些运动方式？ 答:1.甘油磷脂；鞘脂；固醇 2.沿膜平面的侧向运动；脂分子围绕轴心的自旋运动；脂分子尾部摆动；双层脂分子间的翻转运动 2、膜蛋白有哪些基本类型？内在膜蛋白以什么方式与脂双层膜相结合？ 答：1.外在膜蛋白；内在膜蛋白；脂锚定膜蛋白 2.靠离子键或其他较弱的键与脂双层