二维相关红外分析对蛋白质预相变过程的研究.pdf

第28卷。第1o期 2 O08年10月 蛰墓蠹：盖螽。蓦盎一，墓 …凌：娑’；嚣” 二维相关红外分析对蛋白质预相变过程的研究 王立旭，吴玉清 i#★{目分f％自；##目i￡^女§§，☆#*#130012 摘要利用二维相关红外光谱结台主戚分分析研究了棱皤拔酸酶热诱导和压力诱导条件下的构象变化行 为。结果表明热诱导的预相变过程所对应的结构变化与压力诱导的主相变的结构变化具有类似性。 关薯目核话棱酸酶．预相变；兀’IR；主成分分析；二维相关光谱 3 中圈分类号：()657 立献标识码：A 立章墒号；looo_0593C2∞811pol79_02 l 644 蛋白质折叠与去折叠机制的研究是生物化学W分子生物 634咖1蓝移到lcrnl-前者对应fP折叠结构·后 学的重要前措课题之。蛋白质的折叠正确与否不仅直接芰 者对应于r螺旋和元规卷曲结构。 幕到其生物学功能的实觋而且也与许多重大疾病的产生密切 相关…。n外吸收光谱是分析蛋白质二缎结构变化的有力手 段，=维相关分析技术¨1的提出为利用n外光谱揭示溶液中 蛋自质的构象变化提供T更为广搓的应用前景：二维相关n 外分析不但对相互重量的振动峰具有很强的分辨力，而且对 于微弱的结构变化具有独特敏感性。我们曾利用=维相关“ 外。一和近红外光谱“一研究了在温度诱导下藩液中血清白置自 所发生的散辑的二级结构及水合作用变化。主成分分析 (P“吲即Im”pomn㈨Iys*，}℃^)是化学计量学中的常用 方法．它广谨用f实验数据的统计分析，硅行敷据降维、变 量提取与压缩，确定化学组份数、分类和聚娄，H及与其它 方法联用进行数据*理~“。 棱糖桉酸酶(RNaA)是研究蛋白质折叠／击折叠机制 of删鼬^h恤枷№ 脚l h蜘mIepH岫tm∞耐m 的常用的模《蛋白，早期的太多数研究都认为在酸性或中性 r mo p—n 条件下RNaseA的热诱导相变过程为高度协同的W态机 n粗任目Eh一Ⅲ∞∞州at k■岫1帅柚dlm54Kb¨啪柚in口∞瑚tⅡa一 制’，然而．最近有研究表明在其热诱导主相变发生之前似 ⅢlKhr 乎存在一个预过渡巷”·．而且，在压力诱导下这种早期的构 象变化行为也不明确。奉研究小组曾利用变温或变压红外光 圈2为基于一系列的壹Ⅱ红外光谱所得到的主成分分析 谱测试，结合=维相关和PcAt系统研究了温度或Ⅲ力诱导(PcA)组分田(s∞MpJm)．压力升高日『起的谱线形状的变化 下不同水溶液条件下RNa*A的预相变过程，同时还对预相 主要来自组分I和组分2的贡献．结音“往的研究，蛆分l 壹和主相霓过程所对应的结椅变化厦相变机理给出了详尽的 所对应的剧烈的结构变化的中点7o。Kh左右为主相变 分析““。另外．Ⅱ对另一蛋冉质——泛素(ublqultm)在变 点}另外．组分1在丰相变之前300Kb口左右还伴随有微弱 Ⅲ条件T的折叠／去折叠机翩进行了初步探索。 的结构变化过程。因此，由组丹圈可以确定主相变的沮度Ⅱ 圈1为升压过程中RN％eA在氘代Ti}Hcl埋冲藉磕 间为641～764kbar，下面将在其所对应的E力Ⅸ