2017届高考生物二轮复习 专题突破综练 专题14 生物技术实践.docVIP

专题十四　生物技术实践 非选择题(本题共8小题，每小题15分，共120分) 1．(2016辽宁辽南协作体二模，39)为了调查某城市自来水的水质状况，某研究小组测定了自来水水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题： (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。涂布平板所用的培养基是______________(填“固体”或“液体”)培养基；该培养基的制备过程是____________________________。对培养基灭菌的方法是__________法。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基培养了一段时间，若空白培养基出现了菌落，请分析说明原因(写出二个)①__________________；② __________________。 (2)培养基灭菌后，将1 mL水样稀释1 000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为____________。 (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，每次划线之前都要灼烧接种环，目的是______________________的菌种，使下次划线的菌种直接来源于__________ 。 【答案】(1)固体　计算→称量→溶化→灭菌→倒平板　高压蒸汽灭菌　培养基灭菌不合格　倒平板过程被污染(或培养皿灭菌不合格等正确答案均给分)　(2)5.0×108　(3)杀死上次划线后接种环上残留(或杀死接种环上)　上一次划线末端 【解析】(1)涂布平板所用的培养基是固体培养基。固体培养基的制作过程是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基进行培养，若一段时间后出现了菌落，则可能的原因有：培养基灭菌不合格、倒平板过程被污染或培养皿灭菌不合格等。 (2)由题意可知：平板上生长的平均菌落数＝(51＋50＋49)÷3＝50个，则1mL水样中的菌落数＝(C÷V)×M＝(50÷0.1)×1000＝5.0×105个，每升水样中的活菌数为5.0×105×103＝5.0×108个。(3)采用平板划线法分离水样中的细菌，在操作时，每次划线之前都要灼烧接种环的目的是：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上一次划线末端。 2．(2016四川成都七中3月模拟，18)为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。 (1)为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是__________。制备的培养基常用____________法进行灭菌。 K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂 0.1 g 0.5 g 3 g 0.01 g 2 g 15 g 加至1 L (2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，振荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行__________，用________法接种于固体培养基上。接种后的培养基______状态放入培养箱。 (3)选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和__________直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。 (4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的____________(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将__________与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。 【答案】(1)果胶和蒸馏水　高压蒸汽灭菌 (2)梯度稀释(或系列稀释)　(稀释)涂布平板　倒置 (3)水解圈(或透明) (4)上清液　等量失活的粗提果胶酶 【解析】(1)依题意可知：该实验的目的是分离果胶酶产生菌，因此培养基中需要加入果胶，在配制过程中需用蒸馏水定容，所以该表空白处的两种成分是果胶和蒸馏水。制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(2)为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行梯度稀释，并用稀释涂布平板法接种于固体培养基上。接种后的培养基倒置状态放入培养箱，以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染。(3)已知果胶与刚果红结合后显红色。果胶酶产生菌分泌的果胶酶能够将培养基中的果胶水解，当单菌落数目适宜的培养基中加入一定浓度的刚果红溶液一段时间后，洗去培养基表面的刚果红溶液，因菌落周围的果胶被分解，无法形成红色的复合物而出现水解透明圈，所以观察并比较菌落和水解(或透明圈)直径的比值，可筛选出果胶酶高产菌株。(4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的上清液获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适