探针杂交系列CAT#121110A-5（NC膜）CAT#121110B-5（尼龙膜.doc

探针杂交系列 CAT#:121110A-5（NC膜） CAT#:121110B-5（尼龙膜） 常温运输保存 超快核酸转膜试剂盒 Rapid Nucleic Acid Blotting Kit 使用手册V1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址：；电话：400-6765278；电邮：order@ 产品及特点 本产品用于 规格及成分 成份 溶液B 121110A2 100 mL 溶液C 100405 250 mL 硝酸纤维素膜13×20cm 100930 5张（仅A型提供） 带电尼龙膜13×20cm 101122 5张（仅B型提供） 使用手册 1份 运输保存 使用方法 一：Southern印迹膜的制备 按常规方法进行电泳（包括脉冲电泳），本试剂盒不提供电泳所需试剂。如果进行常规的Southern杂交，建议使用0.7%琼脂糖进行电泳，分离酶切的基因组DNA。电泳时最好加电泳分子量对照、酶切对照（先将标记的全长lambda DNA或探针质粒与样品DNA的混合，再酶切）、阴性样品（不含检测片段的DNA样品）、杂交分子量对照（标记的lambda/Hind III） 转膜1小时。结束后用铅笔标记核酸结合面以免搞错。注意：不要过夜转膜，否则信号将降低50%。 将印迹膜在中和液中处理10分钟，中和液的用量至少为0.5 mL/cm2印迹膜。 可将凝胶放入EB（0.5ug/mL）溶液中染色30分钟后UV下观察残留核酸的量，反推转膜效率。此步也可跳过。 将印迹膜夹在两层滤纸中间80℃干燥15分钟以固定核酸（不需真空），干燥时间不需延长，否则杂交信号可能会降低。 此时印迹膜可直接用于后续的核酸杂交实验或者在干燥状态下保存待用（可放数月）。 二：Northern印迹膜的制备 按常规方法进行电泳，本试剂盒不提供电泳所需试剂。本方法适用于甲醛变性胶和乙二醛变性胶，电泳后和荧光标尺并排拍照。 凝胶不需要变性和中和处理（也不能变性，否则RNA将会降解），直接进入转膜步骤（同Southern印迹膜制备的第3到第9步）。 关联产品 生物素或DIG标记的全长lamda DNA 生物素或DIG标记的lambda/Hind III 荧光标尺 核酸印迹膜再生液