高中生物2.2.1《动物细胞工程》新人教版选修4说课.pptVIP

复习回顾： 1.植物组织培养的原理？ 2.简述植物组织培养的过程？ 3.简述植物体细胞杂交的过程？ 2.2 动物细胞工程 单克隆抗体等 动物细胞工程常用的技术 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 是其他动物细胞工程技术的基础。 为什么要进行动物细胞培养? 1.动物细胞培养 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 1.1概念 原理： 细胞增殖 1.2 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 大部分细胞死亡 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，繁殖能力越强，越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 贴壁生长 接触抑制 10代以内，保持正常二倍体核型 传代培养 原代培养和传代培养、细胞株和细胞系 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 胚胎或幼龄动物的组织器官 单个细胞 细胞悬浮液 细胞株 剪碎 加培养液 制成 传代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 原代培养 传代培养 原代细胞 细胞系(遗传物质已改变) 动物细胞培养过程 思考与探究 动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？ 动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 1、无菌、无毒的环境 1.3 动物细胞培养的条件 a.培养液和培养器具无菌处理 b.添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染 c.定期更换培养液，防止代谢产物积累危害细胞 2、营养 补充合成培养基中缺乏的物质 葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等 培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别 1.3 动物细胞培养的条件 3、温度和pH 温度 36.5 +0.5度 pH 7.2-7.4 4、气体环境： O2细胞代谢所必需的 CO2维持培养液的pH （95%空气和5% CO2 ） （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞 （3）用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究 1.4 动物细胞培养的应用 植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的全能性 细胞增殖 培养基性质 固体培养基 液体培养基 培养基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 培养结果 植物体 细胞株、细胞系 培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株 获得细胞或细胞分泌蛋白 2.动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物） 分 类 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 2.1 动物细胞核移植概念： 动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱，用动物体细胞克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。 2.2体细胞核移植的过程： 供体细胞 卵巢卵母细胞 细胞培养 大量供体细胞 去掉细胞核 去核的卵母细胞 重组细胞 重组胚胎 代孕母体 生出与供体遗传物质相同的幼体 减数第二次分裂中期 显微操作去核法 注入 显微注射法 通过电激使两细胞融合 发育 胚胎移植 （传代10代以内的细胞） 讨论： 1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。 培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。 2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？ 3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体