选修1-5.3血红蛋白的提取和分离学案.docVIP

血红蛋白的提取和分离导学案 首次由我国科学家领导的人类肝脏蛋白质组计划，取得了阶段性成果。已经成功 测定出6788个高可信度的中国成人肝脏蛋白质；发现了包含1000余个“蛋白质-蛋白质” 相互作用的网络图；建立了2000余株蛋白质抗体。同学们，肝脏中的蛋白质成千上万， 这些蛋白质是如何被分离出来的呢？它需要那些基本技术与方法呢？ 问题探究 一、蛋白质分离的原理 1、阅读教材P64课题背景，思考了解 ①、红细胞的特点是什么？②、根据红细胞的特点推测蛋白质的作用是什么？ 2、阅读P64-66基础知识，思考并掌握 ①、分离蛋白质依据的原理是什么? 方法是什么？ ②、凝胶色谱法分离蛋白质的概念是什么？原理是什么？材料是什么？ ③、缓冲溶液的含义是什么？配制是什么？作用是什么？ ④、电泳的含义是什么？分离样品的原理是什么？常用方法有哪些？ ⑤、测定蛋白质相对分子质量大小通常使用哪种电泳方法？迁移速率主要取决于蛋白质的什么特性？ 二、血红蛋白的分离与提取 1、 阅读P66-69实验操作，思考并掌握 1、蛋白质的分离和提取一般布骤是什么？2、血红蛋白的组成是什么？为什么呈现红色？ 3、防止新鲜血样凝固一般可以加什么？ 4、红细胞洗涤的目的是什么？离心时注意什么？加生理盐水的作用是什么？ 5、血红蛋白的释放需要加入什么试剂？原理是什么？ 6、分离血红蛋白离心时需注意什么？从上到下分为哪几层？ 7、透析的原理是什么？目的是什么？作用又是什么？透析袋内外分别装的是什么溶液？ 2、纯化蛋白质的方法是什么？目的是什么？ （1）凝胶色谱柱的制作步骤有哪些？ （2）凝胶色谱柱的装填步骤有哪些？需要注意什么？ （3）样品的家入和洗脱步骤有哪些？需要注意什么？如何判断色谱柱制作成功？ 3、 蛋白质纯度的鉴定方法是什么？ 知识巩固 1、 用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质（ ） A．路程较长，移动速度较慢 B．路程较长，移动速度较快 C．路程较短，移动速度较慢 D．路程较短，移动速度较快 2、 利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来（ ） A. 相对分子质量大的 B. 溶解度高的C. 相对分子量小的D. 所代电荷多的 3、 蛋白质提取和分离分为哪几步（ ） A. 样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 B. 样品处理、凝胶色谱操作、纯化 C. 样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 D. 样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定 4、凝胶色谱法是根据（ ）分离蛋白质的有效方法。 A分子的大小 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度 5、缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。 A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度 6、电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。 A相同 B相反 C相对 D相向 7、 哺乳动物和人的成熟的红细胞中的（ ）与氧气的运输有关。 A血红蛋白 B肌红蛋白 C肌动蛋白 D肌球蛋白 8、血液由血浆和各种血细胞组成，其中（ ）的含量最多。 A白细胞 B血小板 C红细胞 D淋巴细胞 9、为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂（ ）。 A. NaCl B.甲苯 C.蒸馏水 D.柠檬酸钠 10、将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3 层是（ ） A. 无色透明的甲苯层 B. 脂溶性物质的沉淀层 C. 血红蛋白的水溶液 D. 其他杂质的暗红色沉淀物 11 、 红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是 携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题： （1）血红蛋白提取和分离的程度可分为四步：______ 、______ 、______ 和______ 。 （2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血 红蛋白溶液。 ①加入柠檬酸钠的目的是__________________。 ②以上所述的过程即是样品处理，它包括______ 、______ 、收集血红蛋白溶液。 （3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是__________________。 ②透析的原理是__________