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基因工程及其应用
高中二年级下学期人教版生物第六章第二节
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怎样让奶牛产出人奶呢?
目的基因
供体细胞
受体细胞
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一、基因工程的基本步骤
(一) 、提取目的基因
(二)目的基因与运载体结合
(三)将目的基因导入受体细胞
(四)目的基因的检测和表达
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1、要想获得目的基因必须用限制酶切几个切口?
思考与讨论:
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2、会产生几个黏性末端?
思考与讨论:
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基因的运载体
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用同种限制酶切割
DNA连接酶
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作为运载体必须具备哪些条件?
1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2.具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。
3.对宿主细胞无毒害作用。
4.具有某些标记基因,便于进行筛选。
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1、常用的受体细胞:
大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等
2、常用微生物作受体细胞的原因:
微生物增殖快、代谢快、目的产物多。
3、若运载体是质粒,受体细胞为细菌应作何处理:
应用CaCl2处理
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操作过程中用到哪些工具?
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(一)、基因的“剪刀”
1、分布:
主要在微生物中
专一性
3’,5’-磷酸二酯键
一般产生黏性末端(或产生平末端)
——限制性核酸内切酶
二、基因工程的工具
4、结果:
3、切割具体部位:
2、作用特点:
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(二)、基因的针线——DNA连接酶
作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。
连接的是什么部位?
3’,5’-磷酸二酯键
Eva
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