仪器分析-HPLC复习版10-11.pptVIP

第三章高效液相色谱分析HPLC 高效液相色谱法以气相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上，采用颗粒很细的固定相以及高压泵输送流动相建立的一种液相色谱法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. §3-1 高效液相色谱法的特点 高压 150-350×105 Pa 高速 比经典LC快数百倍,流速可达1～10mL·min-1 高效 大于30000塔板/米 高灵敏度: 10-9g （紫外检测）、10-11g （荧光检测） 所需试样量很少:微升试样足以全分析 试样不被破坏，易回收,分析重现性好 应用范围广泛 可分析80%有机化合物，尤适于高沸点、热不稳定、 相对分子量大(﹥400)有机及生化试样的分离分析 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测 主要差别：分析对象的差别和流动相的差别 1．分析对象的区别 GC：适于能气化、热稳定性、沸点较低的样品， 占有机物的20% HPLC：试样不需气化，只需制成溶液，即可在室温下进样分析 不受样品挥发性和热稳定性的限制 分子量大、高沸点、热稳定性差及生化样品、高分子和离子型样品均可检测 用途广泛，占有机物的80% HPLC与GC差别 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2．流动相的区别 GC：流动相为惰性气体 对组分无亲合作用，仅起运载作用。 HPLC：流动相可选用不同极性的液体 与组分有亲合作用力，通过参与固定相对组分 作用的竞争，提高柱的选择性、改善分离度， 为选择最佳分离条件提供了极大方便。 流动相种类较多，选择余地广， 改变流动相极性和pH值对分离起到调控作用， 选用不同比例的两种或两种以上液体 作为流动相可增大分离选择性。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 3．操作条件差别 GC： 较高温度下进行 HPLC：室温； 高压（液体粘度大，峰展宽小） 高效液相色谱法的主要缺点: 仪器设备费用昂贵 操作严格 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、速率理论 液体的扩散系数仅为气体的万分之一 §3-2 影响色谱峰扩展及色谱分离的因素 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 1、涡流扩散项及其影响 讨论： 降低固定相粒度可提高柱效 2、传质阻力项及其影响 液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍， 故降低传质阻力是提高柱效主要途径 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Hm为流动相对板高影响项 Hsm为固定相微孔内流动相对板高影响项 Hs为固定相（液）对板高影响项 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2