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如何改善强水溶性化合物的保留和分离
奥秘科技/AUMI Technologies (US)
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改进水溶性化合物的保留和分离
使用极性反相色谱柱,高水相流动相;调整pH值抑制分析物的离子化。
使用离子对试剂,选择低比表面、短链键合相
使用HILIC分离技术
使用离子交换/反相混合固定相
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2,-0-甲基-腺嘌呤核苷HPLC方法
RT样品峰=18.902min RT主杂质峰=21.024min 主峰与后杂峰
(RT=20.634min)的分离度R=7.81, 主峰后杂峰(RT=20.634min)与主要杂质的分离度R=1.70
色谱柱:Aumi Baulo C18 5um 100? 4.6*250mm; 波 长:260nm; 柱 温:30℃; 流 速:1.0mL/min
流动相:流动相A:0.63g甲酸铵溶解于900ml水中,并用甲酸调PH=3.00,再加水使溶液为1L,过滤即得; 流动相B:乙腈
样 品:流动相A溶解,待分离样品1mg/mL;进 样:5ul
梯度表:
时间(min)
A(%)
B(%)
0
100
0
20
90
10
35
90
10
35
100
0
45
100
0
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阿奇霉素有关物质检测
空白
药典方法
样品,100%水
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次黄嘌呤有关物质分析
色谱柱:Aumi Baulo C18 5um 100? 4.6*250mm
流动相:0.1%磷酸氢二钠溶液(磷酸调节pH值至7.50)
流 速:1.0ml/min
柱 温:室温
波 长:254nm
样 品:样品2.0mg/ml(水溶解),对照品0.2408mg/ml(客户原液)
进 样:5ul
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Venusil HILIC (丙酰胺键合相)
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键合相,原理和目的
丙酰胺键合硅胶
已腈/水流动相中主要依靠氢键合和电子极化作用,对于多羟基,多氨基,酰胺类和有机酸有很好的保留和分离
在弱极性流动相中,对于极性化合物的保留与NH2相似或略低,有利于极性化合物的洗脱
水溶液中稳定性明显优于氨基柱或纯硅胶柱
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正相条件下与氨基柱比较
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