生物实验常用溶液的配制答案.docVIP

常用溶液的配制 贮存液配方 solution Ingredients MW Dose Note 10M/L NaOH NaOH 40.00 4g 搅拌溶解 T·H2O 10ml 1M/L Tris·Cl Tris(HOCH2)3CNH2 121.14 12.11g 微波炉加热溶解，冷却后浓盐酸调pH至8.0，加三蒸水定容至100ml 浓盐酸 约5ml T·H2O 80ml 0.1M/L EDTA EDTA （C10H6N2O8） 292.25 2.92g 微波炉加热溶解，冷却后10M/L NaOH调pH至8.0，加三蒸水定容至100ml T·H2O 80ml RNA酶A母液10mg/ml RNA酶A 100℃加热15分钟,使混有的DNA酶失活。冷却后用1.5ml eppendorf管分装成小份保存于-20℃ 10mmol/L Tris·Cl(pH7.5), 15mmol/L NaCl 工作液配方 solution Ingredients materials Dose Note 溶液Ⅰ 50mmol/L Glucose Glucose (C6H12O6?H2O)198.17 0.99g 搅拌溶解后定容至100ml，高压灭菌4℃保存 25mmol/L Tris·Cl 1M/L Tris·Cl 2.5ml 10mmol/L EDTA 0.1M/L EDTA 10ml T·H2O 50ml 溶液Ⅱ 1％SDS SDS 1g 分开常温保存，用时临配。1ml溶液Ⅱ：1%SDS 980μl +10mol/L NaOH 20μl T·H2O 100ml 0.2mol/L NaOH 溶液Ⅲ 5 mol/L KAc CH3COOK MW:98.14 60ml 定容至100ml, 并高压灭菌。溶液终浓度K+ 3mol/L,Acˉ5mol/L。冰醋酸 28.5ml LB液体培养基(Luria-Bertani)(Tryptone) 10 g 溶于800ml去离子水中NaOH调pH至7.5，加去离子水至总体积1升,高压下蒸气灭菌20分钟 酵母提取物(Yeast extract) 5 g NaCl 10 g LB固体培养基 LB液体培养基 100ml 高压灭菌后成凝胶状，用时微波炉加热至100℃以上溶解，加入5mg/ml Ampcillin 1ml（终浓度为50ug/ml），摇匀后倒入培养皿中，冷却凝固即可涂板 琼脂粉 1.2g 氨苄青霉素(Ampicillin, Amp)工作液 Ampcillin（规格0.48g,80万U） 1支 5mg/ml贮存液（终浓度为50ug/ml）, -20℃保存备用 三蒸水 100ml 溶菌酶溶液(10mg/ml) 溶菌酶溶液 0.1g 分装成1ml/小份，保存于-20℃,每一小份一经使用后便予丢弃 10mmol/L Tris·Cl(pH8.0) 10ml 3mol/l NaAc (pH5.2) NaAc·3H2O 40.81g 冰醋酸调pH至5.2，加水定容至100ml，分装后高压灭菌,储存于4℃冰箱 三蒸水 50ml TE缓冲液 10mmo/LTris·Cl， 1M/LTris·Cl(pH8.0) 0.5ml 加水定容至50ml，高压灭菌后EP管分装备用 1mmol/L EDTA 0.1M/LEDTA(pH8.0) 0.5ml T·H2O 49ml TBE 缓冲液 (5×) Tris 54g 定容至1000ml 硼酸 27.5g， 0.5M/LEDTA(pH8.0) 20m l 上样缓冲液 (6×) 0.25% 溴酚蓝 溴酚蓝 0.25g 定容至100ml 40% (w/v) 蔗糖水溶液 蔗糖 40g 三蒸水 80ml 0.7％琼脂糖凝胶 琼脂糖粉 0.14g 微波炉加热溶解。温度降至50℃左右加入2μl EB（溴化乙锭）后制胶 1×TBE 20ml 50 x TAE, pH~8.5 (40mM Tris 碱, 40 mM 醋酸, 1 mM EDTA) Tris-碱 242 g Tris加300ml去离子水加热搅拌溶解后，加入0.5M 的EDTA（pH8.0）100ml，再加冰醋酸，去离子水调整体积到1升 冰醋酸 57.