超级耐药菌NDM1研究进展与对策.pptVIP

NDM-1的检定 碳青霉烯类不敏感菌 纸片法 PCR 改良HODGE 荧光PCR EDTA E Ttest条 分子流行病学 EDTA 纸片协同法 耐药机制和感控 NDM-1 的检测方法 NDM-1，即新德里金属β-内酰胺酶-1型，是由细菌质粒上携带的blaNDM-1基因编码的。目前，国际上已有五十余篇关于NDM-1的研究性文章或相关部门报告发表。 由blaNDM-1编码产生的碳青霉烯酶及因此产生的对碳青霉烯类耐药性可以通过现有推荐使用的表型鉴定方法准确、可靠的鉴定出来 [1] US CDC. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2010 Jun 25;59(24):750. [2] Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2009 Dec;53(12):5046-54. CLSI M100-S20及CLSI M100-S20-U碳青霉烯类折点 2010年 抗菌药物 纸片扩散法 (mm) 　 稀释法(mg/L) M100-S20 M100-S20-U M100-S20 M100-S20-U S R S R 　 S R S R 多利培南 - ≥23 ≤19 - ≤1 ≥4 厄他培南 ≥19 ≤15 ≥23 ≤19 ≤2 ≥8 ≤0.25 ≥1 亚胺培南 ≥16 ≤13 ≥23 ≤19 ≤4 ≥16 ≤1 ≥4 美罗培南 ≥16 ≤13 ≥23 ≤19 ≤4 ≥16 ≤1 ≥4 表型筛查试验 纸片扩散法： 美罗培南（10ug）或亚胺培南（10ug）： 抑菌圈直径≤22mm 肉汤稀释法或Etest法 美罗培南或亚胺培南:MIC≥2ug/ml 亚胺培南适合于大肠埃希菌，克雷伯菌属，沙门菌属，肠杆菌属 变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属对亚胺培南敏感性下降是由产碳青霉烯酶外的其他机制引起，因此对这些菌株尚未建立用亚胺培南MIC法进行筛选和确认碳青霉烯酶，并且亚胺培南纸片法对所有肠杆菌科碳青霉烯酶的筛查效果都不好 [1] Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2009 Dec;53(12):5046-54. [2] Kumarasamy KK et al. Lancet Infect Dis. 2010 Sep;10(9):597-602. 表型确认实验 双纸片协同试验:采用亚胺培南(10μg)、EDTA（1500μg） 两种纸片进行K-B法，两纸片距离10-15mm，在含EDTA纸片方向处，亚胺培南抑菌圈扩大，即可判定产金属酶。 采用亚胺培南（美罗培南）/EDTA复合纸片进行K-B法药敏试验，复合纸片比单药纸片的抑菌圈直径增大值≥5mm 亚胺培南（美罗培南）/EDTA复合E试条协同试验测定MIC，单药与复合制剂的MIC比值≥8，即可判定产金属酶。 表型确证试验 纸片扩散法： Etest法： 双纸片协同法： 改良霍奇试验(modified Hodge test) 自动化鉴定与药敏仪器 [1] Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2009 Dec;53(12):5046-54. [2] Kumarasamy KK et al. Lancet Infect Dis. 2010 Sep;10(9):597-602. 表型确证试验 纸片扩散法：亚胺培南(10ug)/亚胺培南(10ug)+ EDTA(1500mM 10ul)复合纸片 结果判读：复合纸片比单药纸片抑菌环直径增大≥5mm 图：复合纸片法判定金属β-内酰胺酶示意图 (左纸片：亚胺培南/EDTA, 右纸片：亚胺培南) [1] Yong D et al. J Clin Microbiol. 2002 Oct;40(10):3798-801. 表型确证