自消旋Naproxen酯或硫酯进行转酯化合成(S)-Naproxen前驱药.doc

自消旋Naproxen硫酯進行轉酯化合成(S)-Naproxen 前驅藥 張春生 Chun-Sheng Chang 南台科技大學化學工程學系 Department of Chemical Engineering Southern Taiwan University of Technology 蔡少偉 Shau-Wei Tsai 國立成功大學化學工程學系 Department of Chemical Engineering National Cheng-Kung University 摘要 在異辛烷溶劑中將(R,S)-naproxen硫酯與4-morpholine ethanol利用脂解酵素進行催化光學選擇之硫轉酯化反應，同時利用三辛基胺將Ｒ型硫酯自我消旋。可獲得超過65％之產率及95％光學純度之S型產物。當醇類濃度在5mM時有最大之初始速率顯示醇類為酵素抑制劑。水解旁反應之(S)-naproxen 其產率及水解初始速率可藉由提高醇類濃度及利用固定化酵素較一般酵素含水量較低之特性加以抑制。 關鍵詞：動態分割、脂解酵素、硫轉酯化、Naproxen酯類、酵素、生物觸媒 Abstract A lipase-catalyzed enantioselective thiotransesterifcation between (R,S)-naproxen thioester and 4-morpholine ethanol under in situ racemization of the (R)-thioester by trioctylamine in isooctane was developed. More than 65% yield and 95% enantiomeric excess for the desired (S)-ester product were obtained. Maximum in the initial rate was found at the alcohol concentration of ca. 5 mM, which indicates the alcohol to be an enzyme inhibitor. The initial hydrolysis rate and the yield of the undesired (S)-naproxen were suppressed by increasing the alcohol concentration or employing an immobilized lipase containing less water than the free enzyme. Keywords: Dynamic resolution; Lipase; Thiotransesterifcation; Naproxen ester; Enzyme; biocatalysis 一、前言 為了提高反應速率、轉化率及產品光學純度，一般常先將酯類反應物之官能基加以修飾，例如三氟乙基酯中三氟乙基吸電子能力最大，此種帶吸電子基之酯類稱為活化酯(activated ester)，且產生之三氟乙醇沸點低(沸點77 ℃)分離容易，故較廣為被採用。以Porcine pancreatic 脂解酵素分割(R,S)-2-octanol為例，此類活化酯之反應速率比未活化酯大致快1~2個級數[1]。整個製程中除了產物的分離純化以外就是所餘50%未反應(R)-Naproxen反應基質的分離及消旋等繁複步驟，不過此種問題將利用動態動力分割加以解決。 酵素催化動力分割並同時連接消旋步驟是否可行，取決於反應基質能否被添加之消旋(racemase)催化進行消旋，或者反應基質對掌中心上之氫原子具足夠酸性，在中度或微鹼性條件下能夠去質子化(deprotonation)並再質子化(reprotonation)達到消旋目的。由於硫酯對掌中心上之α氫較一般氧酯類之α氫為酸，因此我們假設某些羧酸之硫酯對掌中心上之α氫酸性足夠去質子化，於酵素催化動力分割下可同時進行消旋。由文獻發現，利用脂解酵素可對幾種硫酯進行動力分割但並沒有加入反應基質自我消旋的步驟[2-4]。 對(R,S)-Naproxen而言，若酵素具有完全的選擇性，理論上可獲得100%的目標(S)-對掌異構物。以自我消旋化為例，(R)-型及(S)-型基質間必須存在一可加成之中間物，故在鹼存在下，如圖1 所示，α位置之氫原子必需脫離並產生中間物。由於醯基產生共振效應，得到穩定的另外四種無法加成(即具共振)的中間產物，然而當酯鍵中醇基由硫基取代時，由於氧原子與硫原子電子軌道不同，故無法得到具有共振效果能力之穩定中間體。此外若