应用于抗体分离纯化的疏水电荷诱导色谱配基和性能评价.pdfVIP

应用于抗体分离纯化的疏水电荷诱导色谱配基和性能评价 史清洪，程征，孙舒，孙彦 天津大学化工学院生物化工系，天津，300072 摘要：获取高品质（高纯度、低杂质）的抗体产品已经成为抗体制备中的一个瓶颈问题。本文对新型疏水电荷 诱导色谱（HCIC ）配基 4 （咪唑-1-基）苯胺在抗体吸附和分离中的性能进行了研究。抗体和血清白蛋白（BSA, 抗体生产中的重要杂蛋白）在烯丙基活化法制备得到的 HCIC 色谱吸附剂 AN-Sepharose 上的吸附平衡结果显 示，在 20 mmol/L 磷酸缓冲液（pH 8.0 ）中，抗体在AN-Sepharose 上的吸附展现出一定的耐盐特性，同时这种 吸附受到乙二醇的抑制；而在氯化钠存在条件下 BSA 的吸附则显著不同于抗体。随着缓冲液pH 值降低，抗体 的吸附容量迅速减小，意味着大部分抗体可以通过调节流动相的pH 值加以洗脱。从蛋白质混合物中纯化抗体的 结果显示，抗体的纯度超过90% 。由此，该色谱介质显示了其在抗体分离中的巨大应用潜力。 关键词：抗体；疏水电荷诱导色谱；蛋