2015-2016学年苏教版选修一 植物的组织培养技术及DNA和蛋白质技术 课件（79张）.pptVIP

解析 “DNA粗提取与鉴定”的实验材料选用鸡血细 胞液，而不用鸡全血，主要原因是DNA主要储存于 细胞核内，而不在血浆内，使用鸡血细胞液提高材 料中的细胞数量和DNA含量，从而可以保证实验提 取到的DNA数量。图A、B、C所示为本实验的三个 关键步骤。图A通过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相 混合而使血细胞处于极低浓度的溶液中，细胞因大 量吸水而导致最终破裂，并释放出胞内物。图B通过 纱布过滤使血细胞释放出的DNA滤入收集的滤液中 （将大量胶状物滤出），再在滤液中加入2 mol/L的 NaCl溶液使DNA的溶解度增加。图C在DNA浓盐溶 液中加入蒸馏水（大量），可使溶液的NaCl浓度降 至较底，由于DNA在较低浓度的NaCl溶液中溶解度 很低（在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，浓度 再变小则DNA溶解度将增大），使DNA析出，经过 滤等手段可以收集到DNA。甲基绿为比较常用的细 胞核染色剂，染色后细胞核中染色体呈绿色，属碱 性染料，可以用来鉴定DNA。 答案 （1）DNA （2）使血细胞吸水涨破，放出 DNA 使滤液中的DNA溶于浓盐溶液 使DNA 析出 （3）甲基绿 （4）①溶液不变蓝 溶液 变蓝 ②加快颜色反应速度 耐受性 ③对照 ④加入DNA（丝状物）的多少 4.2008年5月20日民政部等制订汶川大地震遇难人 员遗体处理意见指出，无法确认遇难者身份的， 由公安部门提取可供DNA检验的检材以便事后 身份辨认。事后的遗体辨认可借助于DNA杂交 技术，即从遗体细胞与死者家属提供的死者生 前生活用品中分别提取DNA，然后借助DNA杂 交技术对遗体进行确认。据此回答： （1）为了确保辨认的准确性，需要克隆出较多 的DNA样品。这需借助PCR技术。使用PCR技术 的具体实验操作顺序是： 按配方准备好各组分→ →离心使反应液 集中在离心管底部→设计好PCR仪的循环程序→进 行PCR反应。 请写出图中方框的步骤: ， 该步操作应特别注意的问题是 。 （2）上表所示为分别从死者遗体和死者生前的生 活用品中提取的三条相同染色体上的同一区段DNA 单链的碱基序列，根据碱基互补配对情况进行判 断，A、B、C三组DNA中不是同一人的是 。 （3）为什么从死者体细胞与死者家属提供的其生 前生活用品中分别提取的DNA可以完全互补配对？ 。 解析 PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技 术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制 出上百万份的DNA拷贝。这项技术有效地解决了因 为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究 的问题，被广泛地应用于遗传疾病的诊断、刑侦破 案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等领域。 DNA杂交技术方法是从遗体细胞和死者家属提供的 死者生前的生活用品中分别提取DNA，在一定温度 下，水浴共热，使DNA氢键断裂，双链打开。若两 份DNA样本来自同一个体，在温度降低时，两份样 本中的DNA单链通过氢键连接在一起，若不是来自 同一个体，则两份样本中的DNA单链在一定程度上 不能互补，DNA杂交技术就是通过这一过程对面目 全非的死者进行辨认的。 答案 （1）用微量移液器在微量离心管中依次加入 各组分 PCR实验使用的微量离心管、枪头、缓冲 液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌 （2）B、C （3）人体所有体细胞均由一个受精卵有 丝分裂产生，其细胞核中均含有相同的遗传物质 5.对血红蛋白（Hb）的研究结果表明，血红蛋白实际 上是由珠蛋白、原卟琳和二价铁离子（Fe2+）所组成 的结合蛋白质，由4条肽链各结合一个辅基即血红 素，O2结合于Fe2+上，血红蛋白与氧疏松结合形成氧 合血红蛋白（HbO2）,这种氧合作用在氧分压高时容 易进行，在氧分压低时易于解离。红细胞结合和携 带O2的过程并不影响Fe2+，也就是说不会使之氧化 为Fe3+。Fe3+无携带O2的能力。CO与Hb的亲和力大 于O2，结合成HbCO后不能分离，致使Hb丧失运输 O2和CO2的机能，这称为一氧化碳中毒即煤气中毒。 （1）用凝胶色谱法分离血红蛋白时，待 接 近色谱柱底端时，才用试管收集。血红蛋白因含 而呈现红色。 （2）要使血红蛋白从红细胞中释放出来，可选用的 方法是 。 （3）红细胞具有运输氧的功能，是因为 。 （4）亚硝酸盐为强氧化剂，进入人体后，可使血红 蛋白失去运输氧的功能，导致人体组织缺氧，其可 能的原因是