1.1.1 培养基的配制与无菌操作和接种技术 规范训练（苏教版选修1）.doc

第一 无菌操作技术实践 第一节 微生物的培养和应用 第1课时 (时间：30分钟　满分：50分)考查知识点及角度 难度及题号 基础 中档 稍难 微生物培养基的配制 2 6 8 无菌操作和接种技术 1、4、5 综合考查 3、7 一、选择题(共5小题，每小题4分，共20分) 细菌培养基常在121 ℃压力锅中灭菌。如果只100 ℃温度下将细菌培养基灭菌，下列生物仍会存活的是(　　)。 大肠杆菌 B．一种青霉菌 枯草芽孢杆菌 D．沙门氏菌 解析　芽孢是为了抵御外界不良环境而形成的一种休眠体，100 ℃的温度不能将其杀死。 答案　C 下列物质中，不能用作酵母菌培养基中碳源的是(　　)。 含碳有机物 B．蛋白胨 含碳 D．花生粉饼等天然物质 解析　酵母菌是异养型生物，只能利用有机物中的碳。 答案　C 3．三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36 h后，计算菌落数，结果如表所示。下列选项错误的是(　　)。 培养皿 培养基成分 菌落数 Ⅰ 琼脂、葡萄糖 35 琼脂、葡萄糖、生长因子 250 琼脂、生长因子 0 A.该实验采用的是固体培养基 该实验可采用涂抹平板法接种 和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子 和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类 解析　培养基中均加入了琼脂，故为固体培养基；微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法；Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量，不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子；Ⅱ组和Ⅲ组对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌的生长需要糖类。 答案　C 下列有关平板划线操作的叙述，不正确的(　　)。 第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 解析　接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种；从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源 答案　C 获得纯净培养物的关键是(　　)。 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 接种纯种细菌 适宜条件下培养 防止外来杂菌的入侵 解析　防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键。 答案　D 二、非选择题(共30分) (10分)如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答下面的问题。 成分 含量 NaNO 3 g K2HPO4 1 g KCl 0.5 g MgSO4·7H2O 0.5 g FeSO4 0.01 g (CH2O) 30 g H2O 1 000 mL 青霉素 0.1万单位 (1)依物理性质，该培养基属于________培养基；依用途划分，则属于________培养 (2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是________，培养的微生物可能是________。 (3)该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各成分都熔化后分装前，要进行的是________和________，搁置斜面时，一般需冷却至________左右，在________附近操作。 解析　(1)依物理性质，该培养基中未加凝固剂应属液体培养基；依 (2)由于该培养基中加入了有机碳源，故所培养的微生物应属异养型。 (3)该培养基的碳源是(CH)；培养基熔化后需调节pH并灭菌；搁置斜面时，应冷却至50 ℃左右，操作应在酒精灯火焰旁进行。 答案　(1)液体　选择　(2)异养型　真菌　(3)(CH) 调pH　灭菌　50 ℃　酒精灯火焰 (10分)根据所学的微生物知识回答下列相关的问题。 (1)在大肠杆菌________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还________ ________________________________________________________________。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。 (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。 (5)培养