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3.1菊花的组织培养
有性生殖: 是指必须由有性生殖细胞的结合形成受精卵,然后由受精卵形成新个体的生殖方式。
无性生殖: 是指不经过生殖细胞的结合,直接由母体产生新个体的生殖方式。(言外之意:无性生殖根本不经过有性生殖细胞,也就没有有性生殖细胞的结合。)
营养繁殖
扦插
嫁接
压条
无性生殖
分裂生殖、出芽生殖
组织培养
一、植物组织培养
1、概念
指植物的离体部分(包括任何器官、组织、细胞或原生质体),在人工控制的培养基及环境条件(温度及光照)下,得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。
2、原理:
植物细胞的全能性
概念:
细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。
原因:
生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质。
全能性的比较:
受精卵生殖细胞体细胞
植物体细胞动物体细胞
3、植物组织培养特点
①培养条件可以人为控制
②生长周期短,繁殖率高
③管理方便,利于工厂化生产和自动化控制
(1)培育无病毒植株
(2)大规模培养愈伤组织(提取紫草素,治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料)
(3)人工种子(解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题)
(4)基因工程中亦需用到植物组织培养的方法
4、植物组织培养的应用:
(1)离体的细胞、组织或器官。(外植体)
(2)一定的营养物质和激素。
(3)适宜的外界条件。包括温度、光照、PH等。
二、植物组织培养的基本过程
几个概念:
在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程。
持久性、稳定性
基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果。
形成不同的细胞和组织
④原因:
(1)细胞的分化
①概念:
②特点:
③结果:
(2)脱分化:
由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。
(3)再分化:
脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。
(4)愈伤组织的特点:
是通过细胞分裂形成的,细胞结构疏松而无规则,高度液泡化呈无定形态的薄壁细胞。
思考:如何控制细胞的脱分化与去分化?
通过激素控制。
愈伤组织
Ⅰ愈伤组织及不定芽的诱导
Ⅲ?生根
Ⅳ?炼苗移栽
小红枫的叶片组织培养
三、影响植物组织培养的因素
1、内因——外植体的选取
不同植物的组织培养难度不同,同一种植物的不同组织培养难度不同。
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易;
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难。
2、外因:
(1)营养物质
大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S
微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等
思考:你能说出各种营养物质的作用吗?
微量元素和大量元素:提供植物细胞生活必需无机盐;
蔗糖:提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;
甘氨酸、维生素等物质:主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。
培养基的配制(MS培养基): 大量元素、微量元素、有机物、植物激素
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
(2)植物激素的使用:
生长素类:
2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)
细胞分裂素类:
激动素(KT)、6-苄基嘌呤( 6-BA)、玉米素(ZT)
赤霉素类:
赤霉酸(GA3)
①常用的植物激素:
②生长素和细胞分裂素作用
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。
使用顺序
实验结果
有利于细胞分裂,但不利分化
细胞既分裂、也分化
分化频率高
先使用生长素,后使用细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使用生长素
同时使用
③生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响
使用比例
实验结果
生长素与细胞分裂素比值高
生长素与细胞分裂素比值低
生长素与细胞分裂素比值适中
有利于根的分化
有利于芽的分化,抑制根的分化
促进愈伤组织形成
思考:以下培养基出现的现象反应了什么问题?
菊花的组织培养: pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h
(3)外界条件:
温度、pH、光照
(4)消毒
在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境
植物组织培养的一般过程:
离体组织或细胞
植物体
细胞分裂素≈生长素
愈伤组织
芽
根
细胞分裂素生长素
细胞分裂素
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